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hutingting

银虫 (正式写手)

[求助] 求那些自己改造过载体的大牛们指点

本人刚接触分子,要改造一个载体,将原载体的真核抗性neomycin及其启动子换掉,查阅了文献,我想用的那个启动子的序列报道的各不相同,都有某些位点的碱基差别,最终我该怎么确定我想用的那个启动子的序列呢?有什么原则和要求要注意的?谢谢
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hutingting

银虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by shanqian1988 at 2013-06-06 16:05:29
有几个碱基差别不影响的,你就选择你常用的载体上面的那个启动子 序列就可以的

谢谢。再问一下,启动子与抗性基因之间,抗性基因和终止子之间连接部分的序列,该怎么设计呢?
3楼2013-06-07 13:35:53
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shanqian1988

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
hutingting: 金币+5, ★★★★★最佳答案, 谢谢 2013-06-07 13:34:16
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-06-08 00:09:06
有几个碱基差别不影响的,你就选择你常用的载体上面的那个启动子 序列就可以的
2楼2013-06-06 16:05:29
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dcb005

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
hutingting: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2013-06-08 10:56:27
一般不需要特殊设计,直接用6个碱基的酶切位点就ok,不影响功能
★穷则独善其身,达则兼济天下★
4楼2013-06-07 16:09:01
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leerokr

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
hutingting: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-06-08 10:56:40
看一下先有文献 启动子可以选择管家启动子,
5楼2013-06-08 01:17:59
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