24小时热门版块排行榜    

查看: 1094  |  回复: 6
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

clf0803

银虫 (正式写手)

[交流] 求助DNA提取!

这几天一直在提取细菌的DNA,我用的是上海生工的试剂盒,按照试剂盒的说明步骤提取的,可是电泳图上总是不出带,也不知道什么原因?郁闷中!不知大家有没有遇到过这样的问题?你们用的是什么试剂盒,我们实验室其他人用上海生工的试剂盒提DNA的结果都不理想,目的DNA出带都不明显,是不是试剂盒的问题啊?大虾们帮我分析分析阿!谢谢
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaopu_yin

金虫 (小有名气)


johnsooh(金币+1,VIP+0):thx
你抽提的是细菌、放线菌还是酵母?我用的是博达泰克的试剂盒,一般用液氮或在-80度反复冻融几次就会有较好的效果。总之破胞很重要,而菌体量过多有时效果反而不好。
6楼2007-10-14 09:23:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

guohuayin

木虫 (著名写手)

博士,副教授


johnsooh(金币+1,VIP+0):thx
首先你先检测一下你的有没有提取出DNA,这个问题你可以先测定吸光度,同时也可以测定一下纯度,确定提取出来DNA后,再进行PCR扩增目的基因。扩增的时间一定要加入对照,看看PCR体系有没有问题。
内生菌资源和核酸分子的利用
2楼2007-10-13 08:21:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

自然风

铁杆木虫 (知名作家)

I'm loving plantsoil


plantsoil(金币+1,VIP+0):thx
你的试剂盒加酶之后处理的时间是不是比较短?因为试剂盒与常规提DNA的方法的差别之一就是试剂盒酶处理的时间要短得多,可能有这方面的原因。

另外,你的试剂盒是否是用柱子回收的?可以试试用常规的酚氯仿代替柱子回收看看,因为对于大片段的DNA,用柱子回收效果稍差。

还有,是不是因为样品的量比较少,才导致检测不清楚?

仅供参考
世事喧嚣,人生寂寞
3楼2007-10-13 14:02:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bioartist

木虫 (正式写手)

无菌草莓


plantsoil(金币+1,VIP+0):thx
支持楼上的观点!!
     提取总DNA,破胞很关键!!
     上海生工的试剂盒都是用于一般菌体的提取,对胞外多糖多的细菌和革兰氏阳性菌,一般都比较难提取!
      另外,有时候,试剂盒提取的DNA量非常少,电泳检测不到,但可以用于PCR扩增目的基因,其他操作不宜!!
其实许多传统的方法提取效果都很好的!!
4楼2007-10-13 15:02:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +16 羊腰板 2026-08-21 17/850 2026-08-23 23:02 by tianxiaochun
[基金申请] 让我中一个面上吧! +12 大萍1987 2026-08-20 15/750 2026-08-23 20:44 by 大萍1987
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +4 process2012 2026-08-23 5/250 2026-08-23 19:58 by jurkat.1640
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办? +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +7 且听虎啸 2026-08-17 8/400 2026-08-22 21:55 by 医学老男孩
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +24 yaoyewhu2008 2026-08-20 26/1300 2026-08-22 17:43 by kammury
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +13 ziyangfang 2026-08-19 16/800 2026-08-22 17:08 by WH3796
[基金申请] 人气不行了 +8 fansofjerry 2026-08-21 8/400 2026-08-22 16:30 by zyqchem
[基金申请] 时间戳今天,20号变了 +5 archvillain 2026-08-20 5/250 2026-08-22 06:12 by hui_daxiao
[基金申请] 放榜前的不淡定 40+4 snowwithsea 2026-08-19 14/700 2026-08-21 23:51 by cratir
[基金申请] 今日不放榜?网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +16 医学老男孩 2026-08-20 20/1000 2026-08-21 21:13 by Ldrop2023
[基金申请] 科研孤儿太难了 +17 我4大白菜 2026-08-20 18/900 2026-08-21 20:57 by zhangev
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +7 angus9576 2026-08-17 12/600 2026-08-21 13:38 by weiyin
[基金申请] 我面上完蛋了 +7 且听虎啸 2026-08-20 8/400 2026-08-21 12:31 by 酷酷墨镜
[论文投稿] 投稿咨询 +5 wwm09 2026-08-17 7/350 2026-08-21 10:11 by 期刊论文帮手
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 估计是周四 +3 archvillain 2026-08-18 3/150 2026-08-21 01:48 by jnhyjjm
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
[基金申请] 明天放榜? +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
信息提示
请填处理意见