应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 求助DNA提取！
71/1返回列表
查看: 1093  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

clf0803

银虫 (正式写手)

[交流] 求助DNA提取！

这几天一直在提取细菌的DNA，我用的是上海生工的试剂盒，按照试剂盒的说明步骤提取的，可是电泳图上总是不出带，也不知道什么原因？郁闷中！不知大家有没有遇到过这样的问题？你们用的是什么试剂盒，我们实验室其他人用上海生工的试剂盒提DNA的结果都不理想，目的DNA出带都不明显，是不是试剂盒的问题啊？大虾们帮我分析分析阿！谢谢
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
1楼 2007-10-12 20:33:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

guohuayin

木虫 (著名写手)

博士，副教授
★
johnsooh(金币+1,VIP+0):thx
首先你先检测一下你的有没有提取出DNA，这个问题你可以先测定吸光度，同时也可以测定一下纯度，确定提取出来DNA后，再进行PCR扩增目的基因。扩增的时间一定要加入对照，看看PCR体系有没有问题。
赞一下(10人) 回复此楼
内生菌资源和核酸分子的利用
2楼2007-10-13 08:21:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

自然风

铁杆木虫 (知名作家)

I'm loving plantsoil
★
plantsoil(金币+1,VIP+0):thx
你的试剂盒加酶之后处理的时间是不是比较短？因为试剂盒与常规提DNA的方法的差别之一就是试剂盒酶处理的时间要短得多，可能有这方面的原因。

另外，你的试剂盒是否是用柱子回收的？可以试试用常规的酚氯仿代替柱子回收看看，因为对于大片段的DNA，用柱子回收效果稍差。

还有，是不是因为样品的量比较少，才导致检测不清楚？

仅供参考
赞一下(10人) 回复此楼
世事喧嚣，人生寂寞
3楼2007-10-13 14:02:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bioartist

木虫 (正式写手)

无菌草莓
★
plantsoil(金币+1,VIP+0):thx
支持楼上的观点！！
     提取总DNA，破胞很关键！！
     上海生工的试剂盒都是用于一般菌体的提取，对胞外多糖多的细菌和革兰氏阳性菌，一般都比较难提取！
      另外，有时候，试剂盒提取的DNA量非常少，电泳检测不到，但可以用于PCR扩增目的基因，其他操作不宜！！
其实许多传统的方法提取效果都很好的！！
赞一下(10人) 回复此楼
4楼2007-10-13 15:02:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

clf0803

银虫 (正式写手)
谢谢楼上的高手们！我一般用大概3-5ml的菌液作为一次抽提DNA的样品量，试剂盒加酶后按照说明的处理时间，有时细胞似乎破不了，柱纯化时都离心不下来，后来我延长处理时间，情况似乎改善不大，核酸电泳仍检测不到DNA。不知道高手们都采用什么方法抽提DNA，现在很急啊，大半个月都没提出来，后续实验无法进行，也找不到原因，请大家帮帮忙！
赞一下 回复此楼
5楼2007-10-13 21:18:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaopu_yin

金虫 (小有名气)
★
johnsooh(金币+1,VIP+0):thx
你抽提的是细菌、放线菌还是酵母？我用的是博达泰克的试剂盒，一般用液氮或在－80度反复冻融几次就会有较好的效果。总之破胞很重要，而菌体量过多有时效果反而不好。
赞一下(10人) 回复此楼
6楼2007-10-14 09:23:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

clf0803

银虫 (正式写手)
我抽提的是革兰氏阴性细菌的DNA
赞一下 回复此楼
7楼2007-10-14 15:37:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 clf0803 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 什么时候开奖？ +8 CrisMessi 2026-08-18 9/450 2026-08-23 10:49 by 旋风马1987
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +15 羊腰板 2026-08-21 16/800 2026-08-23 10:45 by process2012
[基金申请] 让我中一个面上吧！ +12 大萍1987 2026-08-20 14/700 2026-08-23 10:30 by wrm
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 10/500 2026-08-23 07:17 by OEbVnUOu01ol
[论文投稿] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 5/250 2026-08-23 03:52 by OEbVnUOu01ol
[基金申请] filecode，4个jtjc了 +13 ziyangfang 2026-08-19 16/800 2026-08-22 17:08 by WH3796
[基金申请] 人气不行了 +8 fansofjerry 2026-08-21 8/400 2026-08-22 16:30 by zyqchem
[基金申请] 今天基金会出结果吗？20260819 +16 kkkl_v 2026-08-19 17/850 2026-08-22 16:12 by 阿布Abu
[基金申请] 时间戳今天，20号变了 +5 archvillain 2026-08-20 5/250 2026-08-22 06:12 by hui_daxiao
[基金申请] 放榜前的不淡定 40+4 snowwithsea 2026-08-19 14/700 2026-08-21 23:51 by cratir
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +10 kulium 2026-08-21 13/650 2026-08-21 21:58 by alongwaytogo
[基金申请] 今日不放榜？网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +16 医学老男孩 2026-08-20 20/1000 2026-08-21 21:13 by Ldrop2023
[基金申请] 科研孤儿太难了 +17 我4大白菜 2026-08-20 18/900 2026-08-21 20:57 by zhangev
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[论文投稿] 投稿咨询 +5 wwm09 2026-08-17 7/350 2026-08-21 10:11 by 期刊论文帮手
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 估计是周四 +3 archvillain 2026-08-18 3/150 2026-08-21 01:48 by jnhyjjm
[基金申请] 今天系统多次维护，明天很可能放榜！ +10 zju2000 2026-08-16 11/550 2026-08-20 20:02 by cl479861084
[基金申请] 时间戳变了，能看出什么问题？ +18 基诺咪客 2026-08-17 23/1150 2026-08-20 17:19 by Godzela
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭