应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 求助DNA提取！
汕头大学海洋科学接受调剂
71/1返回列表
查看: 886  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

clf0803

银虫 (正式写手)

[交流] 求助DNA提取！

这几天一直在提取细菌的DNA，我用的是上海生工的试剂盒，按照试剂盒的说明步骤提取的，可是电泳图上总是不出带，也不知道什么原因？郁闷中！不知大家有没有遇到过这样的问题？你们用的是什么试剂盒，我们实验室其他人用上海生工的试剂盒提DNA的结果都不理想，目的DNA出带都不明显，是不是试剂盒的问题啊？大虾们帮我分析分析阿！谢谢
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
1楼 2007-10-12 20:33:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

guohuayin

木虫 (著名写手)

博士，副教授
★
johnsooh(金币+1,VIP+0):thx
首先你先检测一下你的有没有提取出DNA，这个问题你可以先测定吸光度，同时也可以测定一下纯度，确定提取出来DNA后，再进行PCR扩增目的基因。扩增的时间一定要加入对照，看看PCR体系有没有问题。
赞一下(10人) 回复此楼
内生菌资源和核酸分子的利用
2楼2007-10-13 08:21:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

自然风

铁杆木虫 (知名作家)

I'm loving plantsoil
★
plantsoil(金币+1,VIP+0):thx
你的试剂盒加酶之后处理的时间是不是比较短？因为试剂盒与常规提DNA的方法的差别之一就是试剂盒酶处理的时间要短得多，可能有这方面的原因。

另外，你的试剂盒是否是用柱子回收的？可以试试用常规的酚氯仿代替柱子回收看看，因为对于大片段的DNA，用柱子回收效果稍差。

还有，是不是因为样品的量比较少，才导致检测不清楚？

仅供参考
赞一下(10人) 回复此楼
世事喧嚣，人生寂寞
3楼2007-10-13 14:02:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bioartist

木虫 (正式写手)

无菌草莓
★
plantsoil(金币+1,VIP+0):thx
支持楼上的观点！！
     提取总DNA，破胞很关键！！
     上海生工的试剂盒都是用于一般菌体的提取，对胞外多糖多的细菌和革兰氏阳性菌，一般都比较难提取！
      另外，有时候，试剂盒提取的DNA量非常少，电泳检测不到，但可以用于PCR扩增目的基因，其他操作不宜！！
其实许多传统的方法提取效果都很好的！！
赞一下(10人) 回复此楼
4楼2007-10-13 15:02:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

clf0803

银虫 (正式写手)
谢谢楼上的高手们！我一般用大概3-5ml的菌液作为一次抽提DNA的样品量，试剂盒加酶后按照说明的处理时间，有时细胞似乎破不了，柱纯化时都离心不下来，后来我延长处理时间，情况似乎改善不大，核酸电泳仍检测不到DNA。不知道高手们都采用什么方法抽提DNA，现在很急啊，大半个月都没提出来，后续实验无法进行，也找不到原因，请大家帮帮忙！
赞一下 回复此楼
5楼2007-10-13 21:18:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaopu_yin

金虫 (小有名气)
★
johnsooh(金币+1,VIP+0):thx
你抽提的是细菌、放线菌还是酵母？我用的是博达泰克的试剂盒，一般用液氮或在－80度反复冻融几次就会有较好的效果。总之破胞很重要，而菌体量过多有时效果反而不好。
赞一下(10人) 回复此楼
6楼2007-10-14 09:23:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

clf0803

银虫 (正式写手)
我抽提的是革兰氏阴性细菌的DNA
赞一下 回复此楼
7楼2007-10-14 15:37:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 clf0803 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料工程281还有调剂机会吗 +41 xaw. 2026-04-11 42/2100 2026-04-14 20:05 by honglizhao
[考研] 085500求调剂材料 +11 易11122 2026-04-09 11/550 2026-04-14 17:59 by lhj2009
[考研] 297工科调剂? +13 河南农业大学-能 2026-04-13 13/650 2026-04-14 16:46 by Art1977
[考研] 26药学专硕105500求调剂 +6 喽哈加油 2026-04-13 6/300 2026-04-14 16:40 by zhouxiaoyu
[考研] 293求调剂 +16 我爱高数高数爱� 2026-04-12 18/900 2026-04-13 21:47 by 学员JpLReM
[考研] 本科南方医科大学 一志愿985 药学学硕284分 求调剂 +5 弱水听文 2026-04-09 5/250 2026-04-12 13:16 by shengxi123
[考研] 电气工程专硕320求调剂 +5 小麻子111 2026-04-10 5/250 2026-04-12 10:47 by zhouyuwinner
[考研] 307求调剂 +10 tzq94092 2026-04-10 10/500 2026-04-12 08:18 by wise999
[考研] 化工调剂求导师收留！一志愿失利，踏实肯干，有植物提取科研经历 +20 yzyzx 2026-04-09 21/1050 2026-04-12 00:12 by 小小小小啦啦啦
[考研] 296求调剂 +14 汪！？！ 2026-04-08 15/750 2026-04-11 20:28 by dongdian1
[考研] 270求调剂 +14 杨乐369 2026-04-11 14/700 2026-04-11 20:16 by 蓝云思雨
[考研] 283求调剂 086004考英二数二 +17 那个噜子 2026-04-10 18/900 2026-04-11 16:27 by 明月此时有
[考研] 288求调剂 +15 代fish 2026-04-09 16/800 2026-04-11 10:26 by wwj2530616
[考研] 275求调剂 +9 1624447980 2026-04-08 10/500 2026-04-11 10:20 by Delta2012
[考研] 22408 327分求调剂 +4 韵风kon 2026-04-10 4/200 2026-04-11 09:51 by 猪会飞
[考研] 263能源动力专硕求调剂 +3 加大号饭盒袋 2026-04-10 3/150 2026-04-10 22:23 by 286640313
[考研] 青岛科技大学材料学院，环境学院调剂补录4月10日以前都可以 +3 1青科大。 2026-04-09 5/250 2026-04-10 09:58 by 翩翩一书生
[考研] 314求调剂 +14 weltZeng 2026-04-09 14/700 2026-04-09 23:14 by wolf97
[考研] 考研调剂-材料类-284 +28 想换手机不想解� 2026-04-08 28/1400 2026-04-09 20:08 by 倒数321?
[考研] 化学工程与技术专业一志愿哈工程 291分B区 国家级大创负责人 有一作论文 +13 Emmy~ 2026-04-09 13/650 2026-04-09 14:47 by only周
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭