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Ljiancai

金虫 (小有名气)

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专业: 系统生物学

[求助] 帮忙分析一下HPLC色谱图

各位大侠，最近导师让做一个类似代谢组的实验，用纯甲醇提取了水稻的粗提物，用HPLC分析，怎么跑都是只有几个峰（见附图），C8 和C18柱都用过，结果都差不多。进样程序为：用水和乙腈做为流动相，0-6min，乙腈达到流动相混合液的18％，6-15min，乙腈达到22％，15-30min，乙腈达到58％。设定254m、320nm、210nm、360hm为观测波长。实验室很久以前有师姐做过，跑出来峰还不错（见附图），苦于一直联系不上，没法交流，有哪位大侠可以指点迷津？悬赏额的所有积分啦（小虫只有金币十几枚）.

前人做的.jpg

自己做的.jpg

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1楼 2013-06-02 13:22:40

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qimingfu

新虫 (初入文坛)

应助: 11 (小学生)
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专业: 环境分析化学

【答案】应助回帖

引用回帖:

8楼: Originally posted by Ljiancai at 2013-06-09 00:27:35
是用甲醇提水稻的代谢物,没有做过净化,如果说有净化的话那就是14000rpm离心10分钟,我觉得提取的过程应该不会有问题,因为很简单,就是用甲醇震荡离心,我也感觉机器有问题就是不知道问题在哪,依你的经验应该是哪里出了 ...

水稻的代谢物，是指你来研究水稻本体降解成什么物质了么？我是做作物上农药残留检测的，平时和水稻打交道比较多，我们平时的水稻植株一般都是拿乙腈提取，然后萃取，或者过层析柱，或者加吸附剂净化，然后离心过膜进色谱检测。这种净化的过程应该比你多吧，但是我们的色谱峰依然会有很多杂质峰。所以我就觉得你的色谱图太干净。但是你要我说仪器哪里有问题，我还真说不上来，因为它没有锯齿峰，有响应，调整不同的波长也有不同的响应。我提个建议，你是不是换台液相进一针或者拿一个可靠的样品在这台仪器上进一针，看看这仪器是不是可靠的。如果这仪器可靠，那就要在你的前处理找原因了。