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boluodehai

新虫 (初入文坛)

[求助] CAT POD SOD测定中提取液的问题 已有2人参与

各位大侠 小弟最最近做昆虫中SOD POD 和CAT 活力的测定 因为样品比较难取(周期较长),所以想用一份粗酶提取液测定这三种酶的活性,不知是否可行。另外 我们实验室以前测这三种酶都是分别提取的。同时用一份酶液测没有试过。如果我用PBS提,后面反应体系中是用不同PH的PBS还是其他缓冲液? 提取粗酶的PBS用7.8的还是7的?影响大不大?问题比较乱,诸位见谅
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starseacow

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13楼: Originally posted by kgyl110 at 2014-07-13 22:59:01
真是实验专家,做了那么多的实验来验证不同的情况。你说的检测体系是指提取液提取之后另外再加入的缓冲液么?专业的词汇不太懂,那么计算时候的鲜重如何计算呢?是把同一份酶液分为了好几份儿,那就不能在计算时去研 ...

这些预实验是做研究生的时候,周末没事解闷用的。检测体系指酶活测定时用的缓冲液。
我都是用U/mg蛋白计算酶活性,研磨时鲜重的差别就不用担心了。
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14楼2014-07-15 03:52:50
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starseacow

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感谢参与,应助指数 +1
做植物测抗氧化酶时可以用同一份粗酶提取液测定不同酶活性,不同的酶最终反应体系仍是按照方法建议用相应PH缓冲液,那点样品加进去对体系PH影响有限。
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2楼2013-05-31 18:40:05
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boluodehai

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by starseacow at 2013-05-31 18:40:05
做植物测抗氧化酶时可以用同一份粗酶提取液测定不同酶活性,不同的酶最终反应体系仍是按照方法建议用相应PH缓冲液,那点样品加进去对体系PH影响有限。

谢谢!
“建议用相应PH缓冲液”是指参考文献中其他缓冲液还是相应PH的PBS缓冲液?不同缓冲液会不会冲突?
3楼2013-05-31 19:23:22
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starseacow

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3楼: Originally posted by boluodehai at 2013-05-31 19:23:22
谢谢!
“建议用相应PH缓冲液”是指参考文献中其他缓冲液还是相应PH的PBS缓冲液?不同缓冲液会不会冲突?...

指你参考的酶测定方法文献中,对于测定体系要求的缓冲液。不同缓冲液发生冲突的可能性不大,尤其是你提取时用PBS。
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4楼2013-05-31 20:58:34
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