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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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ycycyc

新虫 (小有名气)

[求助] 关于pcr的问题，没条带？？？？？？

问一下，有没有实验高手，扩增长片段pcr的时候，之前用试剂盒提取的DNA
有产物，换做酚抽提法提取的dna做模版以后就没有产物了。是怎么回事呢？然后又用试剂盒提取的dna做模版，同样的条件，又没有产物了。
所以，弄不明白具体是什么问题。两次试剂盒提取的DNA，用琼脂糖凝胶电泳检测，发现第一次条带较暗，第二次很亮。
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1楼 2013-05-30 14:53:21
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taojun

木虫 (著名写手)
引用回帖:
11楼: Originally posted by ycycyc at 2013-06-02 13:52:28
我后来是用试剂盒法提取的，dna跑胶检测明显看到条带很亮，同时pcr无产物。...

那你看过你的PCR反应的条件了对了吗？比如退火温度
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13楼2013-06-02 19:22:30
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德国工兵铲

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
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ycycyc(myprayer代发): 金币+1, 感谢你的慷慨解囊，期待你的精彩。 2013-05-30 18:51:42
是不是第二次虽然提的浓度较高，但是纯度不够？酚之类的没有除去干净影响PCR效果、
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ycycyc
2楼2013-05-30 15:45:20
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匿名

用户注销 (初入文坛)
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3楼2013-05-30 19:30:21
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ycycyc

新虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 德国工兵铲 at 2013-05-30 15:45:20
是不是第二次虽然提的浓度较高，但是纯度不够？酚之类的没有除去干净影响PCR效果、

dna用nano测了浓度和od值，貌似还可以。现在也不确定，有可能酶出了问题。
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4楼2013-05-30 21:56:30
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