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sd娃娃0911

新虫 (初入文坛)

[求助] 竞争ELISA试验竞争抗原是什么

本人使用原核表达纯化的蛋白，制备多克隆抗体，使用western检测抗体特异性，结果使用原核表达的菌体蛋白上样，仅出现一条带，这能说明抗体的特异性吗？
在投稿后，专家建议是“关于抗体特异性，必须用类似抗做交叉试验才能证明；”现在我纠结了，因为没有类似抗也没有抗原的类似物，交叉试验是什么试验，该怎么做呢？这个问题纠结很久了，请求各位大仙帮下忙啊。
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1楼 2013-05-27 11:45:50
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barneychen

新虫 (初入文坛)
★
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-05-30 11:47:49
原核表达纯化的蛋白, 是那种微生物的核？再用它表达其他蛋白，或者类似的核表达蛋白，和之前的抗体反应。又或者找到和这种抗原类似的蛋白类型来做反应。
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2楼2013-05-30 11:15:22
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上海伊丽萨

铁虫 (初入文坛)
★
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-06-18 12:11:56
多抗是很不特异的，就是说一般明显的菌体全蛋白都有几条很明显的不是你目的蛋白的带和你的多抗反应很好，所以带个阳性的，比如细胞表达的加HA标签蛋白一起跑WB,但严格做交叉反应是比较好的如果不条件，就拿些个对照吧
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3楼2013-06-18 11:55:19
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