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VioletH

木虫 (小有名气)

[求助] 不使用高温的方法,通过调节pH值可以是DNA解链吗

我的实验过程很难控制温度。有没有其他的方法可以是DNA解链?
据说调节pH值可以,那么pH值应该控制在什么范围之内?或者说pH 和DNA 有怎样的关系呢?

另外我的DNA 解链之后还要和RNA结合,所以解链的条件必须要保证不会破坏RNA。

[ Last edited by VioletH on 2013-5-26 at 23:34 ]
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792299196

铁杆木虫 (职业作家)

老虎

【答案】应助回帖

★
感谢参与,应助指数 +1
VioletH: 金币+1, ★有帮助 2013-05-26 23:44:13
在超纯水中就可以解链,文献上就是这么说的,具体我也没敢试!文献你可以找一下2003年mirkin发表在science上的文章!生物条形码的!
今早的容颜老于昨晚
2楼2013-05-26 23:36:47
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VioletH

木虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 792299196 at 2013-05-26 23:36:47
在超纯水中就可以解链,文献上就是这么说的,具体我也没敢试!文献你可以找一下2003年mirkin发表在science上的文章!生物条形码的!

好的,我去看一下。不过,不同地区的超纯水pH也会不用的。。。
3楼2013-05-26 23:43:51
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shixiaba

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
引用回帖:
3楼: Originally posted by VioletH at 2013-05-26 23:43:51
好的,我去看一下。不过,不同地区的超纯水pH也会不用的。。。...

看了一下那片文献,总觉得mirkin的意思就是在nonapure water中加热,虽然人家没有直接那么说……
4楼2013-05-27 08:57:51
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木木803

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与,应助指数 +1
VioletH: 金币+1 2013-05-27 21:51:39
如果DNA双链中有一条5‘端磷酸化的话,可以用lamda exonuclease
5楼2013-05-27 14:24:37
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Lifeng8701

新虫 (小有名气)

不是有一类酶是专门用来解链DNA的吗?叫解旋酶还是解链酶啊?
6楼2013-05-27 19:57:32
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O天琊O

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
VioletH: 金币+1 2013-06-07 09:13:32
用一些化学物质呀,比如甜菜碱等,会使双链解开的
没有什么不可以
7楼2013-06-03 20:43:32
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VioletH

木虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by O天琊O at 2013-06-03 20:43:32
用一些化学物质呀,比如甜菜碱等,会使双链解开的

你那个解开了还可以再结合吗?
8楼2013-06-07 09:14:31
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hb410

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
VioletH: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2013-09-04 12:36:50
DNA解链可以通过调节离子强度或pH来实现
如上面所说 在纯水或离子强度很低时,没有足够的阳离子中和DNA中的磷酸基团,它们之间的排斥作用使DNA解链;
极端的pH如强酸强碱也都可以使DNA解链,它们会破坏双链DNA之间的氢键,甚至还会将DNA水解为单核苷酸(强酸);
个人建议通过调节离子强度好一些,如果非要调节pH,可调至碱性尝试
开心每一天
9楼2013-09-04 10:09:38
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