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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 周集中提土壤dna方法中20%SDS需要调ph值吗
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fddyn

金虫 (小有名气)

[求助] 周集中提土壤dna方法中20%SDS需要调ph值吗

周集中提土壤dna的方法中，用的试剂20%SDS需要调ph值吗？
还有其中用的DNA抽提buffer（ph  8.0）我是这么配的对吗？
10ml 1M Tris-HCl [pH 8.0]（终浓度100 mM）, 20ml 0.5M EDTA [pH 8.0]（终浓度100 mM）,1.64g磷酸钠 [pH 8.0]（终浓度100 mM）, 8.77g NaCl（终浓度1.5 M）, 1g CTAB（终浓度1%），最后调ph 8.0
新手，很多不懂，望指教，谢谢
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1楼 2012-08-04 09:33:32
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fddyn

金虫 (小有名气)
没人回复，只能自己顶了
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2楼2012-08-04 10:02:32
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wangshuswfu

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
fddyn: 金币+2, ★有帮助 2012-08-06 23:47:53
第一，现在都用商业提取试剂盒，omga等、
第二，你用普通方法可以，但是必须纯化，纯化效果最好的是promega有一个产品，不然你扩增不出来。、
第三，我记得用10的SDS 而且没有调pH
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功名几时休！
3楼2012-08-05 22:24:43
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bear0329

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
fddyn: 金币+1, ★有帮助 2012-08-06 23:48:01
不用调的，用他的方法提得还可以的
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以马内利！
4楼2012-08-06 12:54:26
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fddyn

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by wangshuswfu at 2012-08-05 22:24:43
第一，现在都用商业提取试剂盒，omga等、
第二，你用普通方法可以，但是必须纯化，纯化效果最好的是promega有一个产品，不然你扩增不出来。、
第三，我记得用10的SDS 而且没有调pH

我也想用试剂盒，但老板不是做微观的，在这方面投的钱不多而我的样品量大，试剂盒用不起啊
我在原文中看到是20%的SDS，不知10%的SDS是后来在他实验方法上改的还是他原文错误啊
如果你还能查得到，麻烦帮我确认下，谢谢了
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5楼2012-08-06 23:47:22
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wangshuswfu

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by fddyn at 2012-08-06 23:47:22
我也想用试剂盒，但老板不是做微观的，在这方面投的钱不多而我的样品量大，试剂盒用不起啊
我在原文中看到是20%的SDS，不知10%的SDS是后来在他实验方法上改的还是他原文错误啊
如果你还能查得到，麻烦帮我确认下 ...

我硕士那个时候做过的，10和20没有太多区别把，我记得我用的是10，现在我都买试剂盒的。不行你来我实验室做吧，给我干活把，我给你出钱。还给你生活费。
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功名几时休！
6楼2012-08-07 06:30:44
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fddyn

金虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by wangshuswfu at 2012-08-07 06:30:44
我硕士那个时候做过的，10和20没有太多区别把，我记得我用的是10，现在我都买试剂盒的。不行你来我实验室做吧，给我干活把，我给你出钱。还给你生活费。...

要是你能让我发几篇牛paper 倒是可以考虑
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7楼2012-08-08 21:31:41
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baishijie

铁虫 (初入文坛)
sds不要调pH，buffer是最后调pH的
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8楼2012-09-13 21:15:26
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15202284661

新虫 (初入文坛)
那个请问在不在啊，我最近再配这个啊磷酸钠缓冲液怎么配的啊，怎么看到别人有用磷酸二氢钠和磷酸一氢钠配的。
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9楼2015-12-11 15:09:13
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