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fddyn

金虫 (小有名气)

[求助] 周集中提土壤dna方法中20%SDS需要调ph值吗

周集中提土壤dna的方法中,用的试剂20%SDS需要调ph值吗?
还有其中用的DNA抽提buffer(ph  8.0)我是这么配的对吗?
10ml 1M Tris-HCl [pH 8.0](终浓度100 mM), 20ml 0.5M EDTA [pH 8.0](终浓度100 mM),1.64g磷酸钠 [pH 8.0](终浓度100 mM), 8.77g NaCl(终浓度1.5 M), 1g CTAB(终浓度1%),最后调ph 8.0
新手,很多不懂,望指教,谢谢
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fddyn

金虫 (小有名气)

没人回复,只能自己顶了
2楼2012-08-04 10:02:32
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wangshuswfu

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
fddyn: 金币+2, 有帮助 2012-08-06 23:47:53
第一,现在都用商业提取试剂盒,omga等、
第二,你用普通方法可以,但是必须纯化,纯化效果最好的是promega有一个产品,不然你扩增不出来。、
第三,我记得用10的SDS 而且没有调pH
功名几时休!
3楼2012-08-05 22:24:43
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bear0329

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
fddyn: 金币+1, 有帮助 2012-08-06 23:48:01
不用调的,用他的方法提得还可以的
以马内利!
4楼2012-08-06 12:54:26
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fddyn

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by wangshuswfu at 2012-08-05 22:24:43
第一,现在都用商业提取试剂盒,omga等、
第二,你用普通方法可以,但是必须纯化,纯化效果最好的是promega有一个产品,不然你扩增不出来。、
第三,我记得用10的SDS 而且没有调pH

我也想用试剂盒,但老板不是做微观的,在这方面投的钱不多而我的样品量大,试剂盒用不起啊
我在原文中看到是20%的SDS,不知10%的SDS是后来在他实验方法上改的还是他原文错误啊
如果你还能查得到,麻烦帮我确认下,谢谢了
5楼2012-08-06 23:47:22
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wangshuswfu

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by fddyn at 2012-08-06 23:47:22
我也想用试剂盒,但老板不是做微观的,在这方面投的钱不多而我的样品量大,试剂盒用不起啊
我在原文中看到是20%的SDS,不知10%的SDS是后来在他实验方法上改的还是他原文错误啊
如果你还能查得到,麻烦帮我确认下 ...

我硕士那个时候做过的,10和20没有太多区别把,我记得我用的是10,现在我都买试剂盒的。不行你来我实验室做吧,给我干活把,我给你出钱。还给你生活费。
功名几时休!
6楼2012-08-07 06:30:44
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fddyn

金虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by wangshuswfu at 2012-08-07 06:30:44
我硕士那个时候做过的,10和20没有太多区别把,我记得我用的是10,现在我都买试剂盒的。不行你来我实验室做吧,给我干活把,我给你出钱。还给你生活费。...

要是你能让我发几篇牛paper 倒是可以考虑
7楼2012-08-08 21:31:41
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baishijie

铁虫 (初入文坛)

sds不要调pH,buffer是最后调pH的
8楼2012-09-13 21:15:26
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15202284661

新虫 (初入文坛)

那个请问在不在啊,我最近再配这个啊磷酸钠缓冲液怎么配的啊,怎么看到别人有用磷酸二氢钠和磷酸一氢钠配的。
9楼2015-12-11 15:09:13
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