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liangnanas

金虫 (小有名气)

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[交流] 液相色谱中司空见惯现象的成因

以下前提是HPLC-紫外检测器

1.溶剂峰的成因？
一般跑样品的时候，2分钟左右会有溶剂峰，但是溶剂在该检测波长下是没有吸收的呀，这是为什么呢？

2.跑梯度的时候，流动相比例变化基线也会升高或降低，有人说这是有机相变化引起的，但是流动相不是没有吸收吗？为什么基线还会变化？

另外，求助个问题：

我做的是盐酸半胱氨酸的水溶液的定量限及检测限，为什么除了主峰居然还有五六个小杂峰？

做高浓度该物质水溶液时，放至满量程该物质看上去很纯净，只能看到个主峰，稀释100倍左右后，主峰与杂质应同比例稀释，所以应该也只能看到主峰才对，为什么主峰前后还能看到那么多小杂峰呢？

主峰保留时间5min左右。

难道是水中的杂质？但是我用的是超纯水啊

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1楼 2013-05-26 21:15:23

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★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
听不到: 金币+2, 感谢您参与交流，欢迎常来分析版 2013-05-27 09:12:26

先回答第二个问题吧：跑梯度时，仪器默认以初始梯度进行平衡，并以此为0,但在梯度的过程中，有机相的比例与初始比例不一致，那么此时就存在光的透过率不同，转换为电信号（基线）就表现为基线的升高或降低。

第一个问题：你的溶剂与流动相一致吗？不一致的话，就看看上面的回答。
还有色谱柱都有死体积的，在死时间附件就存在基线的剧烈变化。250mm的色谱柱，就在2.5min左右。

稀释后的杂峰有没有可能是基线噪音引起的？