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liangnanas

金虫 (小有名气)


[交流] 液相色谱中司空见惯现象的成因

以下前提是HPLC-紫外检测器

1.溶剂峰的成因?
一般跑样品的时候,2分钟左右会有溶剂峰,但是溶剂在该检测波长下是没有吸收的呀,这是为什么呢?

2.跑梯度的时候,流动相比例变化基线也会升高或降低,有人说这是有机相变化引起的,但是流动相不是没有吸收吗?为什么基线还会变化?

另外,求助个问题:

我做的是盐酸半胱氨酸的水溶液的定量限及检测限,为什么除了主峰居然还有五六个小杂峰?

做高浓度该物质水溶液时,放至满量程该物质看上去很纯净,只能看到个主峰,稀释100倍左右后,主峰与杂质应同比例稀释,所以应该也只能看到主峰才对,为什么主峰前后还能看到那么多小杂峰呢?

主峰保留时间5min左右。

难道是水中的杂质?但是我用的是超纯水啊
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gzl9901

铁杆木虫 (文坛精英)


祝福,祝福,一切顺利!
3楼2013-05-26 22:07:39
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asdry

木虫 (职业作家)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
祝楼主诸事顺利,心想事成!
2楼2013-05-26 21:26:35
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News

专家顾问 (职业作家)


★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
听不到: 金币+2, 感谢您参与交流,欢迎常来分析版 2013-05-27 09:12:26
先回答第二个问题吧:跑梯度时,仪器默认以初始梯度进行平衡,并以此为0,但在梯度的过程中,有机相的比例与初始比例不一致,那么此时就存在光的透过率不同,转换为电信号(基线)就表现为基线的升高或降低。

第一个问题:你的溶剂与流动相一致吗?不一致的话,就看看上面的回答。
            还有色谱柱都有死体积的,在死时间附件就存在基线的剧烈变化。250mm的色谱柱,就在2.5min左右。        

稀释后的杂峰有没有可能是基线噪音引起的?
4楼2013-05-27 08:06:39
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