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如果一个外源基因对细菌有毒性，如何构建过表达载体/回补载体
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| 我有个2700bp的拟南芥基因，已经构建到KS+上并且测序成功了，双酶切（PstI和SalI）后连接到1301S2上做过表达却怎么也连不上，我自己做了十几次，找别人帮忙做了3次也做不出来，每次都是一个克隆都没有；后来找公司做，公司也重复了4次，有很多克隆，但是都是假阳性，一个阳性克隆都没有。会不会是这个基因对细菌有毒性呢？如果是的话，要如何构建过表达载体/回补载体呢？（这个基因用BamHI和XhoI连PBI121也是这种情况） |
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3楼2013-05-24 15:08:53
gyesang
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2楼2013-05-23 20:50:21