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匿名

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11楼2013-05-24 10:33:54
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残刀无痕

新虫 (初入文坛)

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11楼: Originally posted by β内酰胺 at 2013-05-24 10:33:54
不是高人,也就是一起交流学习呀。
我刚才比对了一下序列,是插入了一个碱基和缺失了一个碱基吧,应该会发生移码突变,不知道你后续做什么,估计会有影响的。建议你用高保真酶pfu扩一下重新构建载体。
B片段才900 ...

找公司构大概要多少钱呢?
12楼2013-05-26 20:02:15
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匿名

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13楼2013-05-27 20:07:57
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哈图萨斯90

铜虫 (初入文坛)


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引用回帖:
6楼: Originally posted by zhangj0754 at 2013-05-23 14:22:43
我们一般是用TAKARA的PrimeSTAR酶扩,然后连全式金的pEASY-Blunt 载体,测序,再双酶切,我一般切4小时,回收片段测浓度,载体与片段比例一般1:10,载体用100ng左右, 我们用TAKARA的连接酶,20ul 体系,16度一般连 ...

请问你们回收片段用什么试剂盒回收的啊?测浓度时用仪器还是电泳呢?像酶切产物回收我们很少能回收出浓度超过10ng/ug的,如果载体用100ng的话就要超过酶连体系范围了。
谢谢!
14楼2014-06-23 03:06:53
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