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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 脂肪酶的溶解性
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铜虫 (初入文坛)

[求助] 脂肪酶的溶解性

各位童鞋，请教个问题哈，脂肪酶在PBS中的溶解性好不好，能溶多少？
我把脂肪酶的量放小到0.1mg/mL了，但还是有不溶物，而且不溶的量还挺多，另外，把0.1mg/mL、0.2mg/mL、0.3mg/mL的酶溶液过滤后再紫外分析，发现吸光度居然是不一样的，也就是说溶解的酶浓度是不一样的。这是为什么？
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1楼 2013-05-22 14:58:53
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铜虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by 加内特 at 2013-05-23 09:42:36
冻干后酶变性的量需看冻干条件。我纯化过的纯酶（纯度至少90%）都是纯白色的，冻干前后测酶活对比相差很大，酶活只剩下40%左右就算很好的了。蛋白浓度最好用考马斯亮蓝测。棕黄色的原因是大肠培养时的培养基颜色加 ...

恩哈恩哈，谢谢啦谢谢啦
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5楼2013-05-23 13:26:13
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加内特

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 金币+2, 鼓励发帖交流 2013-05-23 08:07:43
酶冻干后，有少量酶变性了，不能溶解，此时需要离心去掉沉淀才行。再说冻干的酶里含有其他杂质，如杂蛋白，盐等，有干扰。
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少壮不努力，老大徒伤悲！
2楼2013-05-22 15:20:56
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铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 加内特 at 2013-05-22 15:20:56
酶冻干后，有少量酶变性了，不能溶解，此时需要离心去掉沉淀才行。再说冻干的酶里含有其他杂质，如杂蛋白，盐等，有干扰。

哦哦，是这样啊，谢谢啦~
但是只有少量酶变性吗？我虽然没有设法取出不溶物并且称量，但是感觉不溶的部分还挺多的诶。是跟我买的酶纯度不高有关吗？我买的脂肪酶粉末呈棕黄色，有问题吗？
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3楼2013-05-23 00:28:44
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加内特

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
enroll: 金币+20, ★★★很有帮助 2013-05-23 13:32:51
引用回帖:
3楼: Originally posted by enroll at 2013-05-23 00:28:44
哦哦，是这样啊，谢谢啦~
但是只有少量酶变性吗？我虽然没有设法取出不溶物并且称量，但是感觉不溶的部分还挺多的诶。是跟我买的酶纯度不高有关吗？我买的脂肪酶粉末呈棕黄色，有问题吗？...

冻干后酶变性的量需看冻干条件。我纯化过的纯酶（纯度至少90%）都是纯白色的，冻干前后测酶活对比相差很大，酶活只剩下40%左右就算很好的了。蛋白浓度最好用考马斯亮蓝测。棕黄色的原因是大肠培养时的培养基颜色加上大肠本身细胞内的物质造成的。
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少壮不努力，老大徒伤悲！
4楼2013-05-23 09:42:36
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