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狗蛋儿

木虫 (小有名气)

[求助] 以cDNA为模板为什么能扩出内含子? 已有1人参与

求助各位高手:
我在扩一个基因,用的模板是cDNA(抽提完RNA后已用DNase消化)。
困惑一:扩增出了内含子。
困惑二:该基因有8个内含子,只扩增出了4个,求助原因?
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hudazhangyi

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
10楼: Originally posted by 狗蛋儿 at 2013-05-24 17:00:29
每次扩增就这一条带 我怎么才能获得正确的序列呢 或者这种序列存在么?...

换换不同材料的模板也许就可以扩出来了,具体理由是可变剪切是为了适应不同功能需要。祝你好运。
11楼2013-05-26 13:49:28
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wangpeng227

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
狗蛋儿(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-05-22 09:01:54
真核生物RNA有选择性剪接,你扩增到的可能是某种特定剪接方式产物
2楼2013-05-21 21:02:12
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longrna

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
u sure DNase I 消化完完全全的去掉gDNA了?
伟大航线....
3楼2013-05-21 21:03:01
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狗蛋儿

木虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by wangpeng227 at 2013-05-21 21:02:12
真核生物RNA有选择性剪接,你扩增到的可能是某种特定剪接方式产物

可是这样转录出来的序列由于内含子的存在翻译的时候不能读通
4楼2013-05-21 21:53:58
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