24小时热门版块排行榜    

查看: 2726  |  回复: 24
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

lushuiw

银虫 (正式写手)

[求助] T载体克隆做不出来,求帮助

各位战友们,lz在做目的基因与T载体连接,之后转化到DH5α感受态,然后涂板,结果长的特别密,挑到液体培养基摇菌,都是澄清的。大家谁知道是怎么回事呀,做了好长时间了。
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lushuiw

银虫 (正式写手)

引用回帖:
10楼: Originally posted by 静安jingan at 2013-05-19 14:19:59
摇菌的时候不是用不加氨苄的么,转速、温度都控制好可以长起来,只是有时候需要时间很久...

摇菌复苏时没加氨苄,平板上加了,然后挑菌培养的液体培养基也加了。
11楼2013-05-19 19:40:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 25 个回答

wxf8470

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
lushuiw: 金币+2 2013-05-19 14:08:40
lushuiw: 金币+5 2013-05-20 21:52:01
从你的描述,很像是你的平板抗生素失效了。
2楼2013-05-19 08:45:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangqi1107

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
lushuiw(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,感谢你的慷慨解囊,期待你的精彩。 2013-05-19 10:21:46
lushuiw: 金币+2 2013-05-19 14:10:04
amisking: 回帖置顶 2013-05-19 19:55:17
lushuiw: 金币+3 2013-05-20 21:51:55
第一做阴性对照,看是否你的抗生素是否污染了;第二,检测你的感受态细胞不转化连接产物,直接涂板,看是否污染了。第三,放一个空板,看是否倒的培养基有污染。第四,同时做一个阳性对照。再做一个连接产物转化感受态。这五个板要同时做。然后看看结果,一定能检测出来哪里出了问题。
3楼2013-05-19 09:44:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunnyboylg

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
lushuiw: 金币+2 2013-05-19 14:10:19
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-05-19 18:19:12
lushuiw: 金币+2 2013-05-20 21:52:07
1、感受态转化涂板前可在培养皿加点IPTG和x-gal用来挑转化子(蓝色的为没转化进的,白色的是转化了的);2、用空质粒转化做个对照
要么读书,要么旅行,身体和灵魂,必须有一个在路上
4楼2013-05-19 11:04:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 国社科又开始会评了,不知道这次命运如何 +5 雨打竹帘 2026-08-30 9/450 2026-08-30 22:23 by 余韵清
[基金申请] 为什么到现在没收到通知? +5 tannykie 2026-08-29 5/250 2026-08-30 21:05 by purplejack
[找工作] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 4FFAWE8HcgUD 2026-08-29 5/250 2026-08-30 20:29 by hZiFeudZyoGR
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 4FFAWE8HcgUD 2026-08-29 3/150 2026-08-30 20:10 by hZiFeudZyoGR
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 jCd0dEvKHShX 2026-08-29 4/200 2026-08-30 19:35 by hZiFeudZyoGR
[考研] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +5 G6APbkg8SA6w 2026-08-29 6/300 2026-08-30 19:02 by hZiFeudZyoGR
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 G6APbkg8SA6w 2026-08-29 5/250 2026-08-30 18:51 by hZiFeudZyoGR
[硕博家园] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +5 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 6/300 2026-08-30 18:17 by hZiFeudZyoGR
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +5 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 5/250 2026-08-30 18:07 by hZiFeudZyoGR
[博后之家] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +7 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 8/400 2026-08-30 18:07 by hZiFeudZyoGR
[考博] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 5/250 2026-08-30 17:56 by hZiFeudZyoGR
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +4 bud_bud 2026-08-27 7/350 2026-08-29 07:23 by foolishmani
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 9/450 2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 申请删除本帖 +6 lyz123lyz 2026-08-27 7/350 2026-08-27 17:31 by 宁静致远sy
[基金申请] 基金未中,这种答复是模板吗? +5 zhaosm1982 2026-08-27 6/300 2026-08-27 16:00 by lfy8008
[基金申请] 看板上这么多中的,有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +4 bjdxyxy 2026-08-26 4/200 2026-08-26 13:12 by qingmu1201
[基金申请] 今天务委会开完了,明天出结果吗 +19 angus9576 2026-08-25 23/1150 2026-08-26 10:03 by zp519
[基金申请] 某些机构,以效率低为荣,以效率低作为存在感 +9 yuleib84 2026-08-25 10/500 2026-08-25 17:14 by alexon
信息提示
请填处理意见