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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » western blot 的结果分析 及改进
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lym19890612

新虫 (小有名气)

[求助] western blot 的结果分析 及改进

上图为内参，下图为目的蛋白，请问为何会出现这样的结果，目的蛋白的北京好像很深，怎么调整，请各位给分析一下

201305181530 beta-actin 1s79-1.jpg



201305181530  ep3 2s曝光.jpg
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1楼 2013-05-18 17:38:24
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不打酱油

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

背景深应该是抗体浓度太高，建议稀释一下抗体，可以做个梯度。清洗的时间也有一定的影响。
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14楼2013-05-31 16:36:55
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晴天1882

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
lym19890612(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，感谢你的慷慨解囊，期待你的精彩。 2013-05-19 10:24:18
抗体浓度降低点，洗膜时间长点，试试看！

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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人有绝交，才有至交！
2楼2013-05-18 23:56:17
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lym19890612

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 晴天1882 at 2013-05-18 23:56:17
抗体浓度降低点，洗膜时间长点，试试看！

还可以利用这张膜进行重新孵育一抗吗？
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3楼2013-05-19 10:04:42
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晴天1882

木虫 (正式写手)
★
lym19890612(gyesang代发): 金币+1, 有没有好用的stripper 液推荐啊 2013-05-19 18:06:09
引用回帖:
3楼: Originally posted by lym19890612 at 2013-05-19 10:04:42
还可以利用这张膜进行重新孵育一抗吗？...

理论上可行，但不知道你的膜放了多久，用TBST多洗洗膜，把膜上的抗体先洗掉，再孵育抗体。
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人有绝交，才有至交！
4楼2013-05-19 15:54:31
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