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Arsene_Lupin

铜虫 (小有名气)

[求助] 耐盐碱菌全蛋白跑2D

最近在学习双向电泳技术,帮老师跑蛋白。最近拿到一株耐盐碱菌株,提取总蛋白后跑2D(GE),3-10,18cm胶条,正常电聚焦后胶条不是应该从溴酚蓝色变成无色么,可是这几个样阳性端是无色,阴性端还是蓝色,且胶条厚度明显看出蓝色端厚于白色端,老师的几个样品完全变成无色。请教各位虫友可能的原因及解决之道。(此菌之前培养条件是10%Nacl,pH10)

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Arsene_Lupin

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-05-18 00:54:31
嗯。我一般上300μl。你的样品是否做了超速离心?有时候样品中的大颗粒也可能阻碍溶胀和电泳。...

影响会很大么?因为用的是生工的细菌蛋白提取试剂盒,最后一步是3000r取上清,但是之前有用pbs洗,12000离心

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6楼2013-05-18 07:17:08
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Arsene_Lupin

铜虫 (小有名气)

木有人回复呢!顶起来!

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2楼2013-05-16 23:29:28
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
会不会是上样量太大,超过胶条的溶胀能力了?
3楼2013-05-17 08:59:22
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Arsene_Lupin

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-05-17 08:59:22
会不会是上样量太大,超过胶条的溶胀能力了?

每次都是350ul啊,其他都没问题的

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4楼2013-05-17 15:22:12
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