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hjm19831112

铁虫 (小有名气)

[求助] 空白血浆峰干扰药物峰,该怎么办 已有1人参与

各位高手,我做的事兔子的体内药动,但是空白血浆峰老有杂峰在我的药物峰附近出现,通过调流动相的比例和流速,还是没能分开,当流动相:0.03mol/L磷酸二氢钾:乙腈=60:40时,我的药物峰的峰型就不好看 了,变宽了。我从水相为40开始调整了,也相应的调整了流速,还是不行,我该怎么办呢?药物是水溶性的

我摸索的方法是,进一针空白血浆,进一针样品,看在药物峰左右空白血浆有没有杂峰影响
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永不言弃
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jixfeng

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
PSA: 金币+3, 谢谢分享经验,常来指导哈 2013-05-16 12:44:42
生物样品你不进行前处理么?药代的话 主含量 可以加热(考察 影响不大可以接受) 离心 甚至是沉淀剂 。
注:生物药除了学校 实际没有操作过 可能表述不是非常严谨。

就峰的分离的话 你可以固定一个影响因素 在调整另一个影响因素么 甚至于正交试验 水相比例高了后 峰变宽 你可以稍微调整一下PH(或者盐浓度)不要过8(SB)10(XDB)_以C18为例。你的主峰保留时间长的话(10min) 把PH调酸(生物样品 蛋白 肽为多 多为大分子 保留时间相对应该对流动相不敏感)试试,让主峰在前面就出来。峰型再说。
请把你的实验现象(数据贴出来 好么) 大家一起参考
不要寻找借口
2楼2013-05-16 11:57:56
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喵喵与咩咩

铁杆木虫 (著名写手)

要把生活过成诗和远方

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
既然比例;流速都调整了还是无效,你可以试着调节PH,这很关键。再者,不知道你用的是什么柱子,C8,C18或者氨基柱都不可一试。
生命不息,奋斗不止
3楼2013-05-16 14:14:17
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xinyi1440215

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
关键是要从样品前处理和更换色谱柱这两点考虑
4楼2013-05-16 14:47:28
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sendyzhang5210

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
经过样品的前处理、更换色谱柱以及改变流动相,应该能分开,我曾经做过一个品种,用了2个月的时间来做色谱方法,左后终于完美的解决了干扰问题,没找到方法前很是郁闷了很久啊!
5楼2013-05-16 14:58:27
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zhoupeng87

版主 (文学泰斗)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
那是因为没有分开,你就换流动相或者柱子
6楼2013-05-16 15:26:43
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33088605

铁虫 (正式写手)

general

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
血液、组织匀浆液这些生物样品均需要前处理的,血浆中还是含有很多蛋白、激素啥的,需要除去,比较常用的方法是加入一定量有机溶剂(乙腈、乙酸乙酯等)涡旋,然后离心,离心一般在6000 rpm,5 min;看看文献,很多得
伟大的人不需要个人签名
7楼2013-05-16 15:50:33
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hjm19831112

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 33088605 at 2013-05-16 15:50:33
血液、组织匀浆液这些生物样品均需要前处理的,血浆中还是含有很多蛋白、激素啥的,需要除去,比较常用的方法是加入一定量有机溶剂(乙腈、乙酸乙酯等)涡旋,然后离心,离心一般在6000 rpm,5 min;看看文献,很多 ...

谢谢,我尝试了6种除蛋白的方法,也调节了流动相的比例,还是会在药物峰处空白血浆也有峰出现。
永不言弃
8楼2013-05-16 17:31:34
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renjuan029

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

请问,你最后怎么解决的?
新年新气象,好好学习,天天向上。
9楼2017-09-06 09:26:48
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renjuan029

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

请教一下,我现在用的是反向离子对色谱分析盐酸二甲双胍,用的是阿替洛尔作为内标。我先后尝试了用乙腈沉淀蛋白,高氯酸沉淀,三氟乙酸沉淀,但是空白血浆还是有干扰,我的样品峰出在14分钟。我更换了流动相比例,柱温,波长,ph值,但是就是分不开。总感觉干扰峰是随着我的改变而改变的。并且我不同的时间处理的血浆具有一定的差异性。这个血是不同人的血。我一般离心得到血浆后放冰箱冷藏。请问,我这个干扰出现问题的可能性在哪?
新年新气象,好好学习,天天向上。
10楼2017-09-06 09:33:45
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