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荧光发光菌实验，急急急！
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小弟最近在做荧光发光菌急性毒理实验，，碰到一些问题。 基本原理：我的菌能表达一个蛋白frex，它能与菌内的NADH产生binding，然后发出荧光，文献中给出的纯蛋白的荧光激发波长（EX）为498nm，发射波长（EM）为518nm，但是我想用的是活菌体做实验，就遇到了一些问题。 1请问怎么确定该菌最佳荧光激发波长和发射波长是多少？ 补充：其实，我已经按照一些虫友的意见，全波长扫描，步骤如下，确定EM=518nm扫EX，或确定EX=498nm扫EM，但结果却不能跟纯蛋白吻合，我所得的结果非常奇怪，就是无论我EX或EM设定为多少，那么相应的最大峰也是该值，例如，EX=500nm扫描，那么EM=500出现最大峰值。 2它是荧光发光，为fluroscense，而明亮发光杆菌T3是luminenscence，请问二者有和区别？ 3菌体荧光发光实验，有没有统一的标准，例如我查文献单位体积内，发光的光子需满足300万~500万，如何使每次实验都能控制在此范围。 4, 如何提高菌体对毒物的敏感性？ 集思广益，忘广大虫友不吝赐教，谢谢大家啦！ |
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2013-05-14 19:26:13, 1.54 M
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