应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 碱性蛋白Native-PAGE
242/3返回列表上一页123下一页
查看: 5123  |  回复: 23
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

飘零的叶子

新虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-05-27 00:49:43
单体是多大呢？BN-PAGE一般看不到分子量小的蛋白，一般可以看到多聚体或者是蛋白复合物。胶的配方和做法可以参考下面的文献。
Cline and Mori (2001) J Cell Biol 154:719-729...

单体的分子量在20-30kd
赞一下 回复此楼
11楼2013-05-27 08:32:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
小丹木木: 金币+1, 鼓励 交流 2013-05-28 08:25:03
引用回帖:
11楼: Originally posted by 飘零的叶子 at 2013-05-27 08:32:04
单体的分子量在20-30kd...

分子量有些小，BN胶上可以看到50左右的。我觉得小于30不太好。不过你可以试试增加胶的浓度。
赞一下 回复此楼
12楼2013-05-28 07:59:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

飘零的叶子

新虫 (小有名气)
引用回帖:
12楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-05-28 07:59:22
分子量有些小，BN胶上可以看到50左右的。我觉得小于30不太好。不过你可以试试增加胶的浓度。...

恩，看看吧，我还想问就是native-page跑完电泳以后需要固定蛋白吗？！
赞一下 回复此楼
13楼2013-05-28 08:41:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
13楼: Originally posted by 飘零的叶子 at 2013-05-28 08:41:11
恩，看看吧，我还想问就是native-page跑完电泳以后需要固定蛋白吗？！...

你想染色的话是要固定的。不过考染的染液本身有固定作用，不用特意去固定。
赞一下 回复此楼
14楼2013-05-29 07:07:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

飘零的叶子

新虫 (小有名气)
引用回帖:
14楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-05-29 07:07:00
你想染色的话是要固定的。不过考染的染液本身有固定作用，不用特意去固定。...

那都有哪些固定方法呢？！戊二醛固定蛋白可以吗？！
赞一下 回复此楼
15楼2013-05-29 08:32:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
飘零的叶子: 金币+9, ★★★很有帮助 2013-06-01 13:18:01
引用回帖:
15楼: Originally posted by 飘零的叶子 at 2013-05-29 08:32:37
那都有哪些固定方法呢？！戊二醛固定蛋白可以吗？！...

蛋白一般是用甲醇-醋酸固定。
赞一下 回复此楼
16楼2013-05-30 06:07:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

飘零的叶子

新虫 (小有名气)
引用回帖:
16楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-05-30 06:07:38
蛋白一般是用甲醇-醋酸固定。...

现在貌似不是固定的问题了，我感觉是我的蛋白直接没有往胶里跑，用已知的碱性蛋白纯品做了对照，这个对照是有条带的，但是我的目的蛋白一点条带都没有，这会是什么原因呢？！
赞一下 回复此楼
17楼2013-05-30 18:51:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
飘零的叶子: 金币+5, ★有帮助 2013-05-31 08:42:52
你的样品是膜蛋白吗？如果是膜蛋白，需要用弱的去垢剂增溶，否则蛋白在脂分子里，跑不下来的。
赞一下 回复此楼
18楼2013-05-31 08:34:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

飘零的叶子

新虫 (小有名气)
引用回帖:
18楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-05-31 08:34:43
你的样品是膜蛋白吗？如果是膜蛋白，需要用弱的去垢剂增溶，否则蛋白在脂分子里，跑不下来的。

应该不是膜蛋白吧，是用大肠杆菌表达的重组蛋白，在破碎上清里
赞一下 回复此楼
19楼2013-05-31 08:42:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
19楼: Originally posted by 飘零的叶子 at 2013-05-31 08:42:42
应该不是膜蛋白吧，是用大肠杆菌表达的重组蛋白，在破碎上清里...

你跑的样品是纯化的重组蛋白还是从组织里提取的蛋白？如果是重组蛋白，可溶的话应该没问题，如果是从组织里提取的样品，需要知道是否结合在膜上。
赞一下 回复此楼
20楼2013-06-01 04:28:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 飘零的叶子 的主题更新
242/3返回列表上一页123下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 303求调剂 +3 睿08 2026-03-17 5/250 2026-03-17 22:01 by 睿08
[考研] 考研求调剂 +3 橘颂. 2026-03-17 4/200 2026-03-17 21:43 by 有只狸奴
[考研] 085601专硕，总分342求调剂，地区不限 +4 share_joy 2026-03-16 4/200 2026-03-17 21:32 by hmn_wj
[考研] 268求调剂 +7 好运连绵不绝 2026-03-12 8/400 2026-03-17 20:28 by xilongliang
[考研] 本人考085602 化学工程 专硕 +16 不知道叫什么！ 2026-03-15 18/900 2026-03-17 17:05 by ruiyingmiao
[考研] 293求调剂 +6 世界首富 2026-03-11 6/300 2026-03-17 17:04 by ruiyingmiao
[考研] 【0856】化学工程（085602）313 分，本科学科评估A类院校化学工程与工艺，诚求调剂 +7 小刘快快上岸 2026-03-11 8/400 2026-03-17 16:57 by ruiyingmiao
[考研] 070300化学学硕求调剂 +6 太想进步了0608 2026-03-16 6/300 2026-03-16 16:13 by kykm678
[考研] 070305求调剂 +3 mlpqaz03 2026-03-14 4/200 2026-03-15 11:04 by peike
[考研] 080500，材料学硕302分求调剂学校 +4 初识可乐 2026-03-14 5/250 2026-03-14 21:08 by peike
[考研] 本科南京大学一志愿川大药学327 +3 麦田耕者 2026-03-14 3/150 2026-03-14 20:04 by 外星文明
[考研] 297求调剂 +4 学海漂泊 2026-03-13 4/200 2026-03-14 11:51 by 热情沙漠
[考研] 333求调剂 +3 球球古力 2026-03-11 3/150 2026-03-13 21:27 by JourneyLucky
[考研] （081700）化学工程与技术-298分求调剂 +12 11啦啦啦 2026-03-11 35/1750 2026-03-13 21:25 by JourneyLucky
[考研] 材料与化工085600调剂求老师收留 +9 jiaanl 2026-03-11 9/450 2026-03-13 20:22 by JourneyLucky
[考研] 310求调剂 +3 【上上签】 2026-03-11 3/150 2026-03-13 16:16 by JourneyLucky
[考研] 290求调剂 +3 ADT 2026-03-13 3/150 2026-03-13 10:19 by peike
[考研] 化工学硕306求调剂 +9 42838695 2026-03-12 9/450 2026-03-13 10:16 by houyaoxu
[考研] 283求调剂，材料、化工皆可 +8 苏打水7777 2026-03-11 10/500 2026-03-13 09:06 by Linda Hu
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +3 崔wj 2026-03-12 4/200 2026-03-12 19:33 by 求调剂zz
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭