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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 人工合成抗原
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tmty

金虫 (著名写手)

[求助] 人工合成抗原

，我用活性酯（DCC NHS）法合成半抗原，然后与BSA和OVA进行偶联，但是产物里面出现一些沉淀，这样的现象正常吗？在透析之前可以先离心除掉这些沉淀吗？多谢！
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静夜思雨
1楼 2013-05-13 09:28:27
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790206876

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 金币+1, 谢谢参与 2013-05-14 08:08:38
恩，我偶联后也出现了一些沉淀，可能是蛋白自偶联产生的沉淀，离心掉就可以
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tmty
2楼2013-05-13 14:55:01
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tmty

金虫 (著名写手)
送红花一朵
wizardfan: 请尽快对帮助做出评价 2013-05-14 08:08:29
引用回帖:
2楼: Originally posted by 790206876 at 2013-05-13 14:55:01
恩，我偶联后也出现了一些沉淀，可能是蛋白自偶联产生的沉淀，离心掉就可以

好的，谢谢哈。
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静夜思雨
3楼2013-05-13 23:17:24
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一步一步

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
建议最好对你离心后的上清液做个全波长扫描，定性确定一下是否偶联上。
如果你要是免疫的话，沉淀在影响是不大的。直接透析之后免疫就好。
如果直接离心掉的话，担心沉淀中有偶联物，会影响你后续的试验。
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4楼2013-05-15 08:33:45
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tmty

金虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 一步一步 at 2013-05-15 08:33:45
建议最好对你离心后的上清液做个全波长扫描，定性确定一下是否偶联上。
如果你要是免疫的话，沉淀在影响是不大的。直接透析之后免疫就好。
如果直接离心掉的话，担心沉淀中有偶联物，会影响你后续的试验。

谢谢楼主的解答！
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静夜思雨
5楼2013-05-15 08:35:25
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liuruikiki

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

楼主，求教你的偶联方法啊，我最近也在做DCC/NHS偶联，活化后的羧化物（溶剂DMF）加到蛋白溶液中反应结束后都是乳白色的，好像都没成功啊? 求指点啊！添加比例，温度要求……
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6楼2013-06-20 16:08:51
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tmty

金虫 (著名写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by liuruikiki at 2013-06-20 16:08:51
楼主，求教你的偶联方法啊，我最近也在做DCC/NHS偶联，活化后的羧化物（溶剂DMF）加到蛋白溶液中反应结束后都是乳白色的，好像都没成功啊? 求指点啊！添加比例，温度要求……

有没有成功你可以进行紫外扫描啊，我用的活性酯法进行偶联的，因为是第一次做，感觉不是很好的。
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静夜思雨
7楼2013-08-28 16:20:44
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ivyvampire

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

是不是蛋白变性沉淀啦，条件可能要摸一下的
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8楼2013-08-29 10:11:50
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董国良

金虫 (小有名气)
DCC是会产生沉淀的，不是浑浊就好，离心就可
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9楼2015-11-19 14:57:42
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tmty

金虫 (著名写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 董国良 at 2015-11-19 14:57:42
DCC是会产生沉淀的，不是浑浊就好，离心就可

谢谢！
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静夜思雨
10楼2015-11-19 16:56:45
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