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不转录的DNA

金虫 (小有名气)

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专业: 蛋白质组学

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 金币+5, BioEPI+1, 感谢详细的回答 2013-05-13 09:01:48
jiantunyu: 金币+5, ★★★很有帮助, 谢谢 2013-05-13 11:13:52

楼主！你用100Da 的透析袋透析什么？蛋白吗？你的透析袋里都有些什么？有有机物吗？有肌氨酸钠？有Triton X-100吗？你的透析buffer是什么？水吗？············你的问题问的·····诶！！！！！
关键原因在于：透析袋里面的渗透压大于外面！而你的透析袋体积又不够大！

你先要明白道尔顿是什么，他其实就是表示原子质量单位，在生物化学、分子生物学和蛋白组学中经常用D或KD，定义为碳12原子质量的1/12，1D＝1/N g，N为阿弗加德罗常数，其实最开始道尔顿计算出的原子量是我们现在用的当量.
分子量是没有单位的，它是相对分子质量，比值是固定的，用原子量算出来的。

比如你要透析掉的NaCl，它的分子量就是58.44Da！

但是你的透析袋是截留100Da分子量以上，例如假设你的要透析的样品中含有多种有机物质（分子量较大）！而你的透析buffer却是ddH2O,虽然NaCl是透析出来了！但是其中的有机物质呢！！！不还在里面吗，导致里面的渗透压比外面的大，为了平衡！水就不断进入透析袋中！直到膨胀不能在膨胀为止，有时还会透析袋破裂！

建议：
1. 因为你只脱盐！所以建议你在你的透析buffer中加入与你要透析的样品相同的溶剂（NaCL除外）！这样可以减小透析袋内外渗透压之差！
2.如果你已经保持你的透析buffer与你要透析的样品是相同的溶剂（NaCL除外），可能是盐浓度太高了！那么建议你再将透析袋的长度剪长一点，10cm试试！
3.透析不一定是换buffer的最好办法，你可以试一试脱盐柱G25，方面，快速！

就这么多吧，希望能给你点帮助！
建议你一下，下次问问题的时候，最好将问题阐述清楚，稀里糊涂的，别人没办法给你解答！