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不转录的DNA

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
wizardfan: 金币+5, BioEPI+1, 感谢详细的回答 2013-05-13 09:01:48
jiantunyu: 金币+5, ★★★很有帮助, 谢谢 2013-05-13 11:13:52
楼主!你用100Da 的透析袋透析什么?蛋白吗?你的透析袋里都有些什么?有有机物吗?有肌氨酸钠?有Triton X-100吗?你的透析buffer是什么?水吗?············你的问题问的·····诶!!!!!
关键原因在于:透析袋里面的渗透压大于外面!而你的透析袋体积又不够大!

你先要明白道尔顿是什么,他其实就是表示原子质量单位,在生物化学、分子生物学和蛋白组学中经常用D或KD,定义为碳12原子质量的1/12,1D=1/N g,N为阿弗加德罗常数,其实最开始道尔顿计算出的原子量是我们现在用的当量.
分子量是没有单位的,它是相对分子质量,比值是固定的,用原子量算出来的。

比如你要透析掉的NaCl,它的分子量就是58.44Da!

但是你的透析袋是截留100Da分子量以上,例如假设你的要透析的样品中含有多种有机物质(分子量较大)!而你的透析buffer却是ddH2O,虽然NaCl是透析出来了!但是其中的有机物质呢!!!不还在里面吗,导致里面的渗透压比外面的大,为了平衡!水就不断进入透析袋中!直到膨胀不能在膨胀为止,有时还会透析袋破裂!

建议:
1. 因为你只脱盐!所以建议你在你的透析buffer中加入与你要透析的样品相同的溶剂(NaCL除外)!这样可以减小透析袋内外渗透压之差!
2.如果你已经保持你的透析buffer与你要透析的样品是相同的溶剂(NaCL除外),可能是盐浓度太高了!那么建议你再将透析袋的长度剪长一点,10cm试试!
3.透析不一定是换buffer的最好办法,你可以试一试脱盐柱G25,方面,快速!

就这么多吧,希望能给你点帮助!
建议你一下,下次问问题的时候,最好将问题阐述清楚,稀里糊涂的,别人没办法给你解答!
长得比我英俊的,没我有才华!有才华的,没我长得俊!
3楼2013-05-12 11:43:56
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