24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 345  |  回复: 2
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

zhea1057d

新虫 (初入文坛)

[交流] TALENs打靶后检测问题 已有2人参与

尝试做TALENs打靶后是否引起突变的实验,打靶spacer中有PstI识别位点,若引起突变,很可能该位点不再被识别。设计了巢式PCR,并做了两种不同策略做阴性对照样本(wide type基因组),第一种:酶切基因组DNA,再做两轮PCR;第二种:未酶切基因组DNA,做第一轮PCR后酶切,再做nested PCR。结果是两种方案阴性样本都出现很亮的条带,大小与未酶切的PCR产物片段一致。请教是哪里出了问题,还是这个方案不可行?非常感谢!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Renavatio

木虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
直接PCR之后酶切即可!
Undefined!
3楼2013-05-11 21:17:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 3 个回答

bullfrog325

木虫 (正式写手)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-05-11 21:32:37
可以只做一轮PCR然后直接切产物再跑胶, 如果你做巢式第一轮产物没有切干净第二轮下来也会有很多PCR产物的.
另外, 楼主之前有没有TALEN经验? 现在的系统效率是多少? 如果是1%那可能是取样数量还没有够.
2楼2013-05-11 00:22:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿北京化工大学材料与化工(085600)296求调剂 +22 稻妻小编 2026-03-26 22/1100 2026-03-30 16:50 by 晶体之美
[考研] 材料调剂 +10 匹克i 2026-03-23 10/500 2026-03-30 16:19 by wangjy2002
[考研] 材料科学与工程调剂 +8 深V宿舍吧 2026-03-30 8/400 2026-03-30 16:19 by 晶体之美
[考研] 266分,求材料相关专业调剂 +4 哇呼哼呼哼 2026-03-30 4/200 2026-03-30 16:17 by wangjy2002
[考研] 生物技术与工程 +7 1294608413 2026-03-25 8/400 2026-03-30 11:36 by 唐沐儿
[考研] 08工科求调剂286 +3 tgs_001 2026-03-28 3/150 2026-03-29 18:29 by 1018329917
[考研] 0856材料化工调剂 总分330 +14 zhubinhao 2026-03-27 14/700 2026-03-29 10:01 by Sjndkwm
[考研] 材料学硕333求调剂 +11 北道巷 2026-03-24 11/550 2026-03-29 08:31 by fmesaito
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +6 崔wj 2026-03-26 6/300 2026-03-29 01:11 by hanserlol
[考研] 求调剂 +7 争取九点睡 2026-03-28 8/400 2026-03-28 21:07 by 争取九点睡
[考研] 083000学硕274求调剂 +8 Li李鱼 2026-03-26 8/400 2026-03-28 20:33 by 加油向未来啊
[考研] 本科新能源科学与工程,一志愿华理能动285求调剂 +3 AZMK 2026-03-27 5/250 2026-03-28 16:19 by xxxsssccc
[考研] 317求调剂 +6 十闲wx 2026-03-24 6/300 2026-03-28 13:27 by Iveryant
[考研] 张芳铭-中国农业大学-环境工程专硕-298 +4 手机用户 2026-03-26 4/200 2026-03-28 07:17 by mmm just
[考研] 求调剂 +4 零八# 2026-03-27 4/200 2026-03-27 18:07 by yu221
[考研] 材料292调剂 +12 橘颂思美人 2026-03-23 12/600 2026-03-27 15:44 by caszguilin
[考研] 085601 材料工程 313分 求调剂 +5 Ong3 2026-03-27 5/250 2026-03-27 12:24 by goldfish51
[考研] 调剂推荐 +5 清酒714 2026-03-26 6/300 2026-03-27 11:12 by 不吃魚的貓
[考研] 各位老师您好:本人初试372分 +5 jj涌77 2026-03-25 6/300 2026-03-25 14:15 by mapenggao
[考研] 086003食品工程求调剂 +6 淼淼111 2026-03-24 6/300 2026-03-25 10:29 by 3Strings
信息提示
请填处理意见