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TALENs打靶后检测问题 已有2人参与
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| 尝试做TALENs打靶后是否引起突变的实验,打靶spacer中有PstI识别位点,若引起突变,很可能该位点不再被识别。设计了巢式PCR,并做了两种不同策略做阴性对照样本(wide type基因组),第一种:酶切基因组DNA,再做两轮PCR;第二种:未酶切基因组DNA,做第一轮PCR后酶切,再做nested PCR。结果是两种方案阴性样本都出现很亮的条带,大小与未酶切的PCR产物片段一致。请教是哪里出了问题,还是这个方案不可行?非常感谢! |
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