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杨洁儿
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骨DNA检测
最近在做检测骨中DNA 的含量,但始终感觉没有检测出骨中DNA的真实含量,哪位专家可否帮忙分析一下?如有做过相关实验,可否告知具体的操作方法。虔诚感谢!
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1楼
2013-05-08 20:49:18
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杨洁儿
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6楼
:
Originally posted by
fool_proof
at 2013-05-09 12:26:13
我自己没做过,让别人帮忙做过,没有脱钙,检测结果就是很低。盐酸脱钙对DNA会有影响的,最好用EDTA脱钙或者低浓度盐酸。另外,DNA的提取也很关键,磁珠法回收率高一些。...
你找的是哪个公司帮忙做的?
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7楼
2013-05-09 21:52:46
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fool_proof
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【答案】应助回帖
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杨洁儿(红舟流星代发): 金币+10, 代扣代发金币
2013-08-31 12:42:04
定量需要采用Picogreen试剂盒,还可以采用琼脂糖电泳,但是骨用蛋白酶K难于消化,数据总是偏低,需要想办法消化,采用EDTA脱钙可以一试。
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渴望旅游
2楼
2013-05-08 21:58:37
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2楼
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Originally posted by
fool_proof
at 2013-05-08 21:58:37
定量需要采用Picogreen试剂盒,还可以采用琼脂糖电泳,但是骨用蛋白酶K难于消化,数据总是偏低,需要想办法消化,采用EDTA脱钙可以一试。
我也是用的Picogreen试剂盒检测的,但是结果要么是检测不出来,要么是所测不同组之间没有什么差别。
除了采用蛋白酶K消化外,还能用什么消化呢?
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3楼
2013-05-09 09:39:25
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3楼
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杨洁儿
at 2013-05-09 09:39:25
我也是用的Picogreen试剂盒检测的,但是结果要么是检测不出来,要么是所测不同组之间没有什么差别。
除了采用蛋白酶K消化外,还能用什么消化呢?...
中国药典有外源性DNA检测方法,可以参考这个,但是样品的消解都是采用蛋白酶K的,如果有其他酶能够消解样品也可以,消解不能影响DNA。骨材料最好先脱钙,再消解。
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渴望旅游
4楼
2013-05-09 11:42:01
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