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杨洁儿

新虫 (初入文坛)

[求助] 骨DNA检测

最近在做检测骨中DNA 的含量，但始终感觉没有检测出骨中DNA的真实含量，哪位专家可否帮忙分析一下？如有做过相关实验，可否告知具体的操作方法。虔诚感谢！
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DNA检测

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1楼 2013-05-08 20:49:18
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fool_proof

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
杨洁儿(红舟流星代发): 金币+10, 代扣代发金币 2013-08-31 12:42:04
定量需要采用Picogreen试剂盒，还可以采用琼脂糖电泳，但是骨用蛋白酶K难于消化，数据总是偏低，需要想办法消化，采用EDTA脱钙可以一试。
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渴望旅游
2楼2013-05-08 21:58:37
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杨洁儿

新虫 (初入文坛)
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2楼: Originally posted by fool_proof at 2013-05-08 21:58:37
定量需要采用Picogreen试剂盒，还可以采用琼脂糖电泳，但是骨用蛋白酶K难于消化，数据总是偏低，需要想办法消化，采用EDTA脱钙可以一试。

我也是用的Picogreen试剂盒检测的，但是结果要么是检测不出来，要么是所测不同组之间没有什么差别。
除了采用蛋白酶K消化外，还能用什么消化呢？
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3楼2013-05-09 09:39:25
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fool_proof

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 杨洁儿 at 2013-05-09 09:39:25
我也是用的Picogreen试剂盒检测的，但是结果要么是检测不出来，要么是所测不同组之间没有什么差别。
除了采用蛋白酶K消化外，还能用什么消化呢？...

中国药典有外源性DNA检测方法，可以参考这个，但是样品的消解都是采用蛋白酶K的，如果有其他酶能够消解样品也可以，消解不能影响DNA。骨材料最好先脱钙，再消解。
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渴望旅游
4楼2013-05-09 11:42:01
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杨洁儿

新虫 (初入文坛)
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5楼2013-05-09 12:06:12
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fool_proof

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
红舟流星: 金币+2, 应助指数+1, 欢迎来生物材料板块积极应助交流 2013-05-09 23:58:56
内容已删除
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杨洁儿
渴望旅游
6楼2013-05-09 12:26:13
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杨洁儿

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
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6楼: Originally posted by fool_proof at 2013-05-09 12:26:13
我自己没做过，让别人帮忙做过，没有脱钙，检测结果就是很低。盐酸脱钙对DNA会有影响的，最好用EDTA脱钙或者低浓度盐酸。另外，DNA的提取也很关键，磁珠法回收率高一些。...

你找的是哪个公司帮忙做的？
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7楼2013-05-09 21:52:46
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fool_proof

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 杨洁儿 at 2013-05-09 21:52:46
你找的是哪个公司帮忙做的？...

我们单位的其他研究人员做的，不光做骨的，还做其他软组织
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渴望旅游
8楼2013-05-10 08:27:49
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杨洁儿

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by fool_proof at 2013-05-10 08:27:49
我们单位的其他研究人员做的，不光做骨的，还做其他软组织...

哦，好的，谢谢！
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9楼2013-05-10 09:08:15
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