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基因克隆表达ORF长短的问题
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本人最近通过同源克隆的方法得到一条序列，经过ORF分析，发现了3条ORF，他们具有同样的终止子位点，ORF-1比ORF-2长54bp，ORF-3更短。将3个ORF都构建了载体（pUC19），进行了外源的定性的一个表达，结果ORF-1，ORF-2都出现了预期的表型，也就是说含有我要的基因，ORF-3完全没有出现预期的表型，ORF-2的表型比ORF-1明显。 我自己分析觉得：ORF-2即为我要的基因的开放阅读框，表达了具有活性的蛋白，ORF-1表达出来的蛋白可能包含ORF-2表达蛋白的活性部位，所以也有相应的活性，但要弱于准确的活性蛋白，所以表型上要差一点。 不知道这样理解对不对，请大家帮我看看，谢谢了。 |
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