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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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畅言||琪语

新虫 (初入文坛)

[交流] 求助WB大师 已有5人参与

求助WB国手：我研一，做WB第一次显影蛋白分子量20 显影结果很清楚，就是背景很高。现在第二次重新提蛋白，重新上样电泳转膜恒流200mA 2小时  为什么显影不出结果啊。第三次同样什么都没有，但是每次β-actin 显影出来结果都很好。。。难道我连续两次没孵上抗体？
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1楼 2013-05-07 20:59:01
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畅言||琪语

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
14楼: Originally posted by houchm0927 at 2013-05-10 01:02:35
先说我自己做过的，检测的是植物蛋白，28kD左右，湿法转膜200mA恒流2h，没问题。倒是试过只转1.5h，当时结果是SDS-PAGE胶上都还残有显色marker，所以一直2h。个人觉得楼主转膜参数没问题。
我觉得WB没结果原因挺多 ...

好吧  懂了~~~
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15楼2013-05-12 18:27:50
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feixiang1209

新虫 (初入文坛)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-05-08 02:07:37
转膜转过了，下次可以试试少转一会，蛋白本身就小，时间2小时太长了
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2楼2013-05-07 21:02:33
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畅言||琪语

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by feixiang1209 at 2013-05-07 21:02:33
转膜转过了，下次可以试试少转一会，蛋白本身就小，时间2小时太长了

我第一次做是100V 2h  显影量特别多，只是换了台机子，我就恒流了 。我应该继续恒压。2好 可以不
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3楼2013-05-07 21:06:12
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feixiang1209

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by 畅言||琪语 at 2013-05-07 21:06:12
我第一次做是100V 2h  显影量特别多，只是换了台机子，我就恒流了 。我应该继续恒压。2好 可以不...

100v?????你确定？？？？是半干转膜还湿转啊？
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4楼2013-05-07 21:27:53
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