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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 存档旧帖 » 构建PPICZaA重组载体，含终止密码子的目的基因表达含有6his尾巴吗？
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627455987

木虫 (小有名气)

[求助] 构建PPICZaA重组载体，含终止密码子的目的基因表达含有6his尾巴吗？

如题，请教各位大侠，小弟构建的pPICZaA毕赤酵母表达载体，插入的目的基因末端含有终止密码子，请问这样表达出来的蛋白质含有多聚组氨酸的尾巴吗？ 谢谢
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1楼 2013-05-06 20:28:05
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627455987

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 凌波丽 at 2013-05-06 20:37:15
多聚组氨酸的ORF是在目的蛋白质的C末端肯定是有影响，如果其之前有终止密码子的话。

我也是这么认为的，可是之前看到国内一文章，情况相似，但是多聚组氨酸却连在目的蛋白后面，所以有点迷糊
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3楼2013-05-07 16:23:46
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
627455987(gyesang代发): 金币+2, 鼓励回帖应助！ 2013-05-06 22:27:56
多聚组氨酸的ORF是在目的蛋白质的C末端肯定是有影响，如果其之前有终止密码子的话。
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2楼2013-05-06 20:37:15
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

融合蛋白的表达是这样解决的：制造出的mRNA会有两个基因序列，当翻译第一个基因而碰到终止密码子是，核糖体会从mRNA上掉下来，而造成第二个基因无法翻译。解决这一问题的方法，是在两个基因之间加入一个内部核糖体进入位点(internal ribosome entry site,IRES）序列，让第二个基因可由IRES处进行翻译，制造出两个不同的蛋白质。
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4楼2013-05-07 18:07:27
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