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windleakey

金虫 (小有名气)

[求助] 求一个Bamh1 EcorR1 爽酶切体系

最近打算给我的目的基因换两个载体,需要对原质粒和新的两个质粒进行双酶切(Bamh1 EcorR1),可酶切效率一直不高,做了两次都很不成功,怀疑体系有问题,求一个 比较好用的的这两个酶的双酶切体系,谢谢了!
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意孤城_

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,鼓励应助,分子生物版块期待你的更多精彩。同样期待你更详细的应助指导。 2013-05-05 10:38:42
这个貌似和体系关系不是很大吧?首先测测你的载体浓度是多少,根据载体的浓度确定酶切载体的量,比如你的载体浓度<300ng/ul那就在40ul体系加入3-5ul的载体,如果>400加上2-3ul足够了。酶加0.5ul,buffer4ul,其他水补平
2楼2013-05-04 20:32:44
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