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poseidonlyl

金虫 (小有名气)

[求助] 糖醇类化合物HPLC分析

我想要做几种糖醇类化合物的HPLC分析,目前打算用柱前衍生化的方法,用紫外或者荧光检测,用3,5—二硝基苯甲酰氯做羟基衍生化反应。但对具体的实验方法不太了解,大家帮帮忙~~~~
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zly86

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
poseidonlyl: 金币+5, 有帮助 2013-05-02 21:09:48
为什么一定要衍生,不能用亲水色谱试试吗?
2楼2013-05-02 20:59:19
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poseidonlyl

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zly86 at 2013-05-02 20:59:19
为什么一定要衍生,不能用亲水色谱试试吗?

那个是需要特殊的色谱柱是吗?我只有C18柱~~~
3楼2013-05-02 21:09:37
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鸭绿江畔

铁杆木虫 (著名写手)

牛B

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
poseidonlyl: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-05-07 11:07:23
不用这么麻烦,你可以查查waters和agilent公司的耗材手册,都有叫氨基柱的色谱柱,可以专门用来分析糖醇类物质
我那么努力,就是为了在更高的层次遇见你!
4楼2013-05-03 09:19:08
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fujinguo06

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
检测器可以用示差或者蒸发光散射检测器,不需要衍生化处理。氨基柱或者糖柱都可以。
5楼2013-05-03 11:41:53
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ufoking

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我们这边用的是东曹公司的HILIC柱,是一种氨基柱,分离糖类效果不错的,你可以咨询下他们的工程师
6楼2013-05-03 12:27:16
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zly86

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by 鸭绿江畔 at 2013-05-03 09:19:08
不用这么麻烦,你可以查查waters和agilent公司的耗材手册,都有叫氨基柱的色谱柱,可以专门用来分析糖醇类物质

氨基柱不适合分糖吧,建议您去看看亲水作用色谱的那篇综述,讲的很清楚
7楼2013-05-03 18:20:02
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zly86

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by poseidonlyl at 2013-05-02 21:09:37
那个是需要特殊的色谱柱是吗?我只有C18柱~~~...

飘过
8楼2013-05-03 18:20:21
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a254870691

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
poseidonlyl: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-05-07 11:09:16
衍生化反应难做吗?这个不清楚。但是用氨基柱就可以实现糖醇类化合物的分离呀,而且等度洗脱就可以较好的分离,蒸发光检测器,做好标曲,很好定量的。但是对楼主说的衍生化反应不大清楚,直接定量的话可以再交流
每天进步一点点
9楼2013-05-05 16:41:14
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七月的日子

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
听不到: 金币+2, 感谢您的解答,欢迎常来分析版 2013-05-06 16:12:48
听不到: 应助指数+1 2013-05-06 16:12:57
poseidonlyl: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-05-07 11:09:06
首先,确定检测器。看这个东西用什么检测器检测,紫外要有吸收,荧光要有荧光性.紫外的话用分光光度计全波长扫描,找出最大吸收峰。要是看荧光用分子荧光扫描出激发波长和发射波长。要是都没有那就要衍生化才能做。
没必要直接衍生化,麻烦。
第二,柱子,不同的物质用不同的柱子,这些东西厂家产品介绍都有,打电话问工程师或者客服。
第三,流动相,必须有有机相,要不柱子受不了。流动相有机相一般是乙腈或者甲醇,还有超纯水,流动相最好经过0.22um滤膜抽滤脱气,这样效果好。
方法研究是个很宏观的东西,最好还是找几篇文献看看,具体的东西很多人都有做过。找简单的,动手做这样提高很快。
10楼2013-05-06 11:08:32
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