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tangwei0606

铁虫 (正式写手)

[求助] 高分求助:嗜水气单胞菌总蛋白双向电泳的第一向电泳条件

求有经验的虫友:我现在准备做嗜水气单胞菌总蛋白双向电泳,不知道第一向电泳条件,我们实验室的IPG胶条是7cm长,pI3-10。(查找的文献上都是自配的圆筒形胶条。不知道能用这个条件吗?第一向预电泳 200V 15min,300V   30min,400V  2h,上样后电压400V,18h。)如能提供可靠建议,定当高分感谢。
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DBWJ

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

300v     30min(如果是未经处理了可以延长1h-4h)
1000v   30min
5000v   2h

不知道能否帮助你
2楼2013-05-20 16:22:10
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tangwei0606

铁虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by DBWJ at 2013-05-20 16:22:10
300v     30min(如果是未经处理了可以延长1h-4h)
1000v   30min
5000v   2h

不知道能否帮助你

不是至少有四个时间段吗?后面上样后电压是多少?
3楼2013-05-20 16:37:47
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DBWJ

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
tangwei0606: 金币+10 2013-05-23 22:11:59
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2013-05-27 10:35:25
一般3个就够了,5000V是聚焦的时间,在之后可以500V多长时间都行,目的是维持低电压保存
4楼2013-05-21 01:07:10
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tangwei0606

铁虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by DBWJ at 2013-05-21 01:07:10
一般3个就够了,5000V是聚焦的时间,在之后可以500V多长时间都行,目的是维持低电压保存

请问你是做嗜水气单胞菌什么的啊?
5楼2013-05-27 10:11:08
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DBWJ

金虫 (小有名气)

我没有做过嗜水气单胞菌,做过根瘤菌,大肠杆菌。我也不清楚你的菌有什么特性,就是提供一个参考的聚焦条件
6楼2013-05-27 10:49:02
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