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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 转基因 » 怎么鉴定转基因菌株目的蛋白的表达率
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huangyan0517

金虫 (小有名气)

[求助] 怎么鉴定转基因菌株目的蛋白的表达率

老板让公司给做了一个大肠杆菌的转基因菌株，拿回来让我鉴定是否合格，指标质粒上是否有目的基因，目的蛋白的表达率，求高人指教一个实验方案.
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时间在哪里，成就就在哪里
1楼 2013-05-02 09:19:45
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小小亚杰

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励应助！ 2013-05-05 21:00:50
检测质粒上是否有目的基因，你PCR验证或者质粒酶切验证都行，也可以诱导表达后SDS-PAGE电泳检测看是否有目的条带出现。
目的蛋白的表达率我就不知道怎么算了。
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2楼2013-05-02 11:29:22
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eagles123

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
蛋白表达率 可以做western blot 或者MS 打点 然后计算出来
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3楼2013-05-02 14:23:31
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huangyan0517

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 小小亚杰 at 2013-05-02 11:29:22
检测质粒上是否有目的基因，你PCR验证或者质粒酶切验证都行，也可以诱导表达后SDS-PAGE电泳检测看是否有目的条带出现。
目的蛋白的表达率我就不知道怎么算了。

pcr怎么验证，酶切就是把片段切下来然后dna电泳吗？
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时间在哪里，成就就在哪里
4楼2013-05-04 21:23:25
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