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rain-3

[交流] 【求助】有人用考马斯亮蓝法测乳清蛋白么?

我用考马斯亮蓝法测WPI, 标准曲线很不错的说,可是测到样品就有问题了。我知道样品含量有90%以上,可是我测到的最多只有50%,怎么回事啊,有高人指点一下吗?小妹不胜感激。

[ Last edited by calledone on 2007-9-25 at 09:06 ]
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calledone

至尊木虫 (职业作家)

小小木虫

考马斯亮蓝法的缺点是:
   (1)由于各种蛋白质中的精氨酸和芳香族氨基酸的含量不同,考马斯亮蓝法用于不同蛋白质测定时有较大的偏差,在制作标准曲线时通常选用 伽玛—球蛋白为标准蛋白质,以减少这方面的偏差。你选用的标准是这个吗?
   (2)一些物质干扰此法的测定,主要的干扰物质有:去污剂、 Triton X-100、十二烷基硫酸钠(SDS)和0.1N的NaOH。测定的样品中存在吗?
   (3)标准曲线也有轻微的非线性,因而不能用郎伯-比尔定律进行计算,而只能用标准曲线来测定未知蛋白质的浓度。
日行一善,善行一生。
2楼2007-09-25 09:15:54
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maomao82328


calledone(金币+1,VIP+0):感谢热心参与,节日快乐!
说实话,我用考马斯亮蓝法也测过,我的结果是此方法重现性并不是很好,而且有可能每次相差很大,不知道是不是我的操作技术有问题还是其他,后来我改用了其他的测定方法
3楼2007-09-30 17:12:21
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weierdulan

铜虫 (小有名气)

浓度不在线性范围

浓度不在线性范围
4楼2007-10-01 20:42:30
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5楼2007-10-03 19:58:17
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rain-3

嗯,谢谢啦
我用的牛血清蛋白做标准,那如果换别的方法,用什么方法比较好呢?
6楼2007-10-09 13:40:27
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