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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 【求助】有人用考马斯亮蓝法测乳清蛋白么？
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rain－3

[交流] 【求助】有人用考马斯亮蓝法测乳清蛋白么？

我用考马斯亮蓝法测WPI, 标准曲线很不错的说，可是测到样品就有问题了。我知道样品含量有90％以上，可是我测到的最多只有50％，怎么回事啊，有高人指点一下吗？小妹不胜感激。

[ Last edited by calledone on 2007-9-25 at 09:06 ]
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1楼 2007-09-24 21:30:32
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calledone

至尊木虫 (职业作家)

小小木虫
考马斯亮蓝法的缺点是：
   （1）由于各种蛋白质中的精氨酸和芳香族氨基酸的含量不同，考马斯亮蓝法用于不同蛋白质测定时有较大的偏差，在制作标准曲线时通常选用 伽玛—球蛋白为标准蛋白质，以减少这方面的偏差。你选用的标准是这个吗？
   （2）一些物质干扰此法的测定，主要的干扰物质有：去污剂、 Triton X-100、十二烷基硫酸钠（SDS）和0.1N的NaOH。测定的样品中存在吗？
   （3）标准曲线也有轻微的非线性，因而不能用郎伯-比尔定律进行计算，而只能用标准曲线来测定未知蛋白质的浓度。
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日行一善，善行一生。
2楼2007-09-25 09:15:54
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maomao82328

★
calledone(金币+1,VIP+0):感谢热心参与，节日快乐！
说实话，我用考马斯亮蓝法也测过，我的结果是此方法重现性并不是很好，而且有可能每次相差很大，不知道是不是我的操作技术有问题还是其他，后来我改用了其他的测定方法
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3楼2007-09-30 17:12:21
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weierdulan

铜虫 (小有名气)

浓度不在线性范围

浓度不在线性范围
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4楼2007-10-01 20:42:30
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159236478
5楼2007-10-03 19:58:17
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rain－3

嗯，谢谢啦
我用的牛血清蛋白做标准，那如果换别的方法，用什么方法比较好呢？
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6楼2007-10-09 13:40:27
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