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[交流] 【求助】有人用考马斯亮蓝法测乳清蛋白么？

我用考马斯亮蓝法测WPI, 标准曲线很不错的说，可是测到样品就有问题了。我知道样品含量有90％以上，可是我测到的最多只有50％，怎么回事啊，有高人指点一下吗？小妹不胜感激。

[ Last edited by calledone on 2007-9-25 at 09:06 ]

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1楼 2007-09-24 21:30:32

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calledone

至尊木虫 (职业作家)

小小木虫

应助: 25 (小学生)
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在线: 222.1小时
虫号: 67907
注册: 2005-05-15
性别: GG
专业: 食品科学基础

考马斯亮蓝法的缺点是：
（1）由于各种蛋白质中的精氨酸和芳香族氨基酸的含量不同，考马斯亮蓝法用于不同蛋白质测定时有较大的偏差，在制作标准曲线时通常选用伽玛—球蛋白为标准蛋白质，以减少这方面的偏差。你选用的标准是这个吗？
（2）一些物质干扰此法的测定，主要的干扰物质有：去污剂、 Triton X-100、十二烷基硫酸钠（SDS）和0.1N的NaOH。测定的样品中存在吗？
（3）标准曲线也有轻微的非线性，因而不能用郎伯-比尔定律进行计算，而只能用标准曲线来测定未知蛋白质的浓度。