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鸡蛋溶菌酶的测定 已有1人参与
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| 本人是大学本科三年级,最近在做一个在鸡蛋中提取并测定溶菌酶活性的实验,在活性检测中,在溶壁微球菌中加入蛋清提取物,蛋清提取物中含有的溶菌酶将其杀死,每隔15S测定OD值.但是实验要求有一条规定每分钟下降的OD值要在0.03--0.1之间,请问为什么要有这一规定?0.03--0.1这个数值又是从哪里得出来的? |
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2楼2013-05-06 18:58:22
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我这个只是一个老师安排的实验课,只是在实验室里面做一个小量的提取,不知道你所说的工艺路线包括哪些,我就只是把我的流程给你简单地说一下:1.从新鲜鸡蛋中取出蛋清,除去粘稠物,不能有蛋黄,加入2倍的PBS缓冲液,pH=7,搅拌均匀,用八层纱布过滤 2.在20ml已经平衡好的阳离子交换树脂中加入30ml蛋清样品(1中所制),搅拌吸附1h 3.静置使得树脂完全沉淀,去除上清液,树脂用100mlPBS缓慢搅拌洗涤5min,3次 4.将树脂装入层析柱内,用含0.05mol/LNaCl的PBS液洗涤,用紫外分光在280nm处测流出液的吸光度,直至吸光度接近0,流速控制在2-3ml/min 5.用含0.5mol/LNaCl的PBS液体洗脱,没2-3ml收集一管,在280nm处测吸光度,合并吸光度高的提取液 |
3楼2013-05-08 21:20:17