24小时热门版块排行榜    

查看: 5120  |  回复: 16
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

襄阳蓉儿

新虫 (小有名气)

[求助] 关于稀释平板计数法的疑问

1.我用的浇注法,应该24h计数还是48h计数?
2.长了24h后培养基表面的菌落很明显,但是培养基内部的菌就是一个小点点,很难看到,稀释倍数低的平板像是10倍100倍1000倍几乎全部都是一个点一个点大片大片的挺均匀根本看不清。这时该怎么计数呢?稀释度高的培养基内部也有一些点点,是表面和内部的都记上去吗?
3.我一共做了7个梯度的十倍稀释。原菌液倒平板之前的OD是1.13了,稀释十倍之后变成0.13,稀释100倍是0.01,1000居然变成0了,后面的稀释度也是0左右。那这么看来菌液里的菌很少很少很少了,可是为什么平板计数后后面OD值是0的菌长出来的菌落还挺多啊,不数那些点点就差不多在30-300之间,数了差不多1000以上了。。。。
不懂怎么计数。我是想做一个CFU与OD之间关系的曲线来着。

是不是该等平板培养一段时间的同时要将相应稀释倍数的菌同等条件培养呢?是不是菌在平板里扩大培养了所以之前测的OD值是不对的?

[ Last edited by 襄阳蓉儿 on 2013-4-28 at 11:46 ]
回复此楼
少壮不努力,长大pcr
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bingge880306

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

上个问题是1毫升:5000毫升,这样应该没错吧,是这意思吗?
15楼2013-05-07 11:51:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 17 个回答

bingge880306

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+5, 鼓励交流应助! 2013-05-03 20:31:36
关于第一个问题,24小时应该就可以了,时间太长菌落数就难以确定了,后期就都长在一起了,而且后期也有抑制作用了
第二个问题其实都做几个平行试验就可以了,不用计数稀释度低的吧,只要把稀释到最后的菌落数合适的那个梯度多做几个平行试验不就可以倒推回原菌落数吗
第三个问题可能你的操作不当,在空气中就染菌了,是在酒精灯范围内操作的吗?应在酒精的火焰周围15厘米的范围内操作才可以保证不染菌。
希望能帮到你啊
2楼2013-04-28 13:59:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

襄阳蓉儿

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by bingge880306 at 2013-04-28 13:59:48
关于第一个问题,24小时应该就可以了,时间太长菌落数就难以确定了,后期就都长在一起了,而且后期也有抑制作用了
第二个问题其实都做几个平行试验就可以了,不用计数稀释度低的吧,只要把稀释到最后的菌落数合适的 ...

谢谢你
2.倒推的意思是,假如说我的第五个十倍稀释是50个菌落,那倒退回第四个十倍稀释就是500个?
3.你的意思是说培养基内部的小点点是杂菌?不会吧,因为高浓度菌液长出来的是很密密麻麻的小点点,我是倾注平板不是涂布平板所以培养基内部也会有菌的吧?
少壮不努力,长大pcr
3楼2013-04-28 14:30:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bingge880306

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

2.对呀
3.换个培养基试试呢
4楼2013-04-28 19:40:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[教师之家] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 HFw0lei2R37i 2026-08-14 5/250 2026-08-14 22:32 by 4wMiSEwB6436
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 HFw0lei2R37i 2026-08-14 6/300 2026-08-14 22:32 by 4wMiSEwB6436
[基金申请] filecode +6 cratir 2026-08-14 10/500 2026-08-14 18:29 by 笑叹辞穷
[基金申请] 奇怪,两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +8 布布和一二 2026-08-10 11/550 2026-08-14 14:58 by Equinoxhua
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +6 majunge000 2026-08-11 8/400 2026-08-14 14:44 by 医学老男孩
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +23 Lanmanbaby 2026-08-09 37/1850 2026-08-14 13:40 by Equinoxhua
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +10 Tide man 2026-08-10 11/550 2026-08-14 10:30 by 沁言学术
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] FileCode能看出啥? +10 要乐观耀哥 2026-08-10 32/1600 2026-08-14 09:37 by 要乐观耀哥
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +9 majunge000 2026-08-10 12/600 2026-08-13 23:20 by iwuli
[文学芳草园] 阿姨 +4 汪汪锅 2026-08-09 4/200 2026-08-13 19:43 by arzu_hma
[硕博家园] 一作与独作在应聘高校教师时区别大吗 +3 mbygzh 2026-08-08 4/200 2026-08-13 19:31 by 龙-樱
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +11 布布和一二 2026-08-08 22/1100 2026-08-10 11:10 by wmfsnow
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
信息提示
请填处理意见