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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 如何解释这个PCR结果？
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朝着江河走

金虫 (小有名气)

[交流] 如何解释这个PCR结果？ 已有17人参与

连续两次了，PCR结果都是这样，DNA提取没问题。不知道是什么原因，与引物有关吗？

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生命在于运动
1楼 2013-04-27 09:40:44
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
这是出现涂抹带
PCR扩增有时出现涂抹带或片状带或地毯样带。其原因往往由于酶量过多或酶的质量差，dNTP浓度过高，Mg2+浓度过高，退火温度过低，循环次数过多引起。
其对策有：1.减少酶量，或调换另一来源的酶。2.减少dNTP的浓度。3.适当降低Mg2+浓 度。5.增加模板量，减少循环次数。
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29楼2013-07-07 10:47:13
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sl35537417

木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+1, 鼓励发贴交流，为楼主问题解决提供可能的线索！ 2013-04-27 13:49:36
什么样本？基因组DNA还是cDNA？ 做温度梯度了没？
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2楼2013-04-27 09:51:39
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朝着江河走

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by sl35537417 at 2013-04-27 09:51:39
什么样本？基因组DNA还是cDNA？ 做温度梯度了没？

基因组DNA，没做过温度梯度，怎么做啊？谢谢
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生命在于运动
3楼2013-04-27 10:15:24
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sl35537417

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
什么物种的基因组？真核的原核的？找个能做温度梯度的PCR仪  退火温度按照不同温度进行PCR
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4楼2013-04-27 10:34:08
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