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xiong-y-x

金虫 (正式写手)

[求助] 量子点荧光共振能量转移

各位虫虫们,急求啊 我现在发现一个实验问题 如果解决不了 我就没法做了,具体是这样的 ,我用量子点和标记有cy5染料的DNA做荧光信号,参考文献,如果单独混合,应该有两个峰或者一个峰,一个峰应该是量子点的,可是我单独混合后发现量子点的峰不见了,只有cy5染料的峰,不合理啊,不可能发生荧光共振能量转移啊 我还没有将量子点和标记cy5的DNA连接起来,按理说距离应该很远,根本不会发生荧光共振能量转移啊,如果是量子点浓度小了,或者cy5浓度大了,也不会发生这种奇怪的变化啊,量子点的荧光不应该减弱的,除非发生看荧光共振能量转移,但理论上是不会的,所以请做相关实验的虫虫给些宝贵的建议啊 万分感激 帮忙的虫虫金币一定奉上!
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xugehui

铁杆木虫 (著名写手)

general

引用回帖:
7楼: Originally posted by xiong-y-x at 2013-04-24 12:43:50
我也觉得奇怪 但的确是有cy5的峰 我的实验方案前面的应没什么问题啊,今天换了激发扫 也是一样的,没有峰,我就降低了cy5- DNA的浓度,结果cy5的峰是没了,也有量子点的峰可是量子点的峰还是会减小,而且减的还挺多 ...

我也做过类似的实验,没有出现您所说的情况,唉,这个确实够纠结的。不好意思,帮不到你了。如果这个问题解决了,可以给我传授点经验。另外,你确定一下 量子点的荧光强度的减少是否是因为激发波长的变化,或者是因为浓度的减少而造成的。确定激发波长,扫单独量子点溶液、单独Cy5溶液和量子点与Cy5混合液(溶液体积和激发波长不变),对比一下。然后扫一下激发波长为Cy5激发时,Cy5的发射,看有什么不一样。
宇智波-鼬~美到极致是疯狂~
8楼2013-04-24 13:05:43
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xugehui

铁杆木虫 (著名写手)

general

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香。期待你的慷慨解囊。快乐每一天鼓励新虫子来到生物版块交流,期待你的精彩1 2013-04-23 20:44:00
xiong-y-x: 金币+5 2013-04-24 12:39:01
你设定的激发波长是多少?
宇智波-鼬~美到极致是疯狂~
2楼2013-04-23 19:42:38
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xiong-y-x

金虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by xugehui at 2013-04-23 19:42:38
你设定的激发波长是多少?

350,我测了一下量子点紫外吸收在548,但是用这个激发没有350的激发强,所以我就一直用350激发,我也不知道怎么回事,这个激发波长有影响吗

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
3楼2013-04-23 23:03:38
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yz2007433052

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
xiong-y-x: 金币+5, 有帮助 2013-04-24 12:31:43
gyesang: 金币+1, 鼓励应助! 2013-04-24 19:54:00
你重新看看你的链吧 还有 不清楚你的DNA有多少碱基。。。碱基数量少的话 也是不行的 还有 有一种可能是你的量子点直接把你的链给吸附了 你用的水溶性的量子点 不清楚你的量子点外边包着什么东西~~
激浪青春!
4楼2013-04-24 08:40:16
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