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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求解读此PCR 为何如此不堪入目
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会飞的害虫

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
如果PCR反应体系及引物没有问题，可以从模板找找原因。
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不是没有，而是你看不见。
21楼2013-04-24 11:52:27
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渭水凡夫

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
15楼: Originally posted by 李泽豪 at 2013-04-24 08:55:09
10×Buffer           2uL
      dNTPs               1.5uL
      上游引物       0.6uL
      下游引物       0.6uL
       rTaq                 0.5uL
       cDNA                1.5（2)uL
     ddH2O ...

你把引物降到0.3ul模板为2ul  再跑跑
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平静的水和不叫的狗是最可怕的
22楼2013-04-24 19:20:24
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chenyuqin

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
第一张感觉是胶有问题，制胶的时候可以多沸几次，还有检查一下你的缓冲液是不是时间太久，也会造成胶的融化出现弥散的。感觉你的DNA有严重的蛋白污染呀
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where there is a will,there ia a way.
23楼2013-04-24 19:52:20
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alicelchf

木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你这显然没有目标带的节奏嘛！
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修身、齐家、治国、平天下
24楼2013-04-24 20:27:06
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李泽豪

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
22楼: Originally posted by 渭水凡夫 at 2013-04-24 19:20:24
你把引物降到0.3ul模板为2ul  再跑跑...

嗯，好的，谢谢指教
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25楼2013-04-24 20:59:28
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李泽豪

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
23楼: Originally posted by chenyuqin at 2013-04-24 19:52:20
第一张感觉是胶有问题，制胶的时候可以多沸几次，还有检查一下你的缓冲液是不是时间太久，也会造成胶的融化出现弥散的。感觉你的DNA有严重的蛋白污染呀

我用的EB染料
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26楼2013-04-24 20:59:49
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李泽豪

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
20楼: Originally posted by teruisi at 2013-04-24 11:30:49
引物加太多了亲 或者引物设计不合理...

谢谢
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27楼2013-04-24 21:01:32
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李泽豪

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
19楼: Originally posted by 天煞孤星A at 2013-04-24 11:07:45
调一下模板  电压  感光度 量少点跑跑  试试了。

嗯，我在试试
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28楼2013-04-24 21:01:44
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biology-girl

新虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
亲啊，你这个情况，据我的经验判断，不是模版的问题了，而是体系少加了东西。。我也有这种情况的，木事，重做吧。如果你真的担心是模版问题。。就再单独点个dna的胶呗。。杂质太多的话，就稀释一下再P就好了呀。。。反正，我认为。。。体系有问题。
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29楼2013-04-24 21:13:05
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yilunanxia

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
好多引物二聚体啊
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30楼2013-04-25 08:45:09
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