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小科研女dow

木虫 (小有名气)

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引用回帖:

8楼: Originally posted by heroxuning at 2013-04-24 14:20:28
胞内裂解不完全，核酸过多，另外上样量可能过多，跑出条带糊状
上清，酵母很多外源蛋白表达量都很低，胞外分泌的本底蛋白也很少，所以没有明显条带也很正常。可以考虑用TCA浓缩后上样。
我们实验室胞内裂解样是这 ...

为什么我的酵母的正常蛋白也没条带呢？其他师姐做的条件一样但是起码有杂带呀

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做出色的科研人

11楼2013-04-24 20:24:48

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爱上文慧

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【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小科研女dow: 金币+3, ★★★很有帮助, ~~~ 2013-04-25 09:16:51

你有对照菌株吗，就是含有白蛋白的GS115/His+Muts和含有 β－半乳糖苷酶的GS115/His+Mut+ ，选择和你的菌株表型相同的那个作为对照，看看你的诱导条件是不是有问题，如果相同条件下，这个对照表达了而你的扔没有条带，那就是载体或你的蛋白的问题，如果对照都没有条带，可能就是你的诱导条件有问题了。

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每一个你讨厌的现在都有一个不努力的曾经

12楼2013-04-24 22:45:22

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DBWJ

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【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

上样前测下蛋白浓度吧，上样量最好是知道浓度后计算微克数，这样上样能准确一些

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13楼2013-04-24 23:40:41

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CarlJH

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【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

一定活性是什么概念，表达量太低

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14楼2013-04-24 23:54:51

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小科研女dow

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引用回帖:

12楼: Originally posted by 爱上文慧 at 2013-04-24 22:45:22
你有对照菌株吗，就是含有白蛋白的GS115/His+Muts和含有 β－半乳糖苷酶的GS115/His+Mut+ ，选择和你的菌株表型相同的那个作为对照，看看你的诱导条件是不是有问题，如果相同条件下，这个对照表达了而你的扔没有条 ...

做了参照最前面的就是也没有条带..