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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 醛基基片上固定蛋白质
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yaocx226

金虫 (初入文坛)

[求助] 醛基基片上固定蛋白质

文献上很多报道用醛基玻片固定蛋白质，醛基与蛋白质的氨基可以发生共价结合反应，这样就会使蛋白质固定在基片上。
但是我自己买了醛基玻片，将荧光素标记的蛋白质点样在玻片后，用buffer冲洗后蛋白质就都被洗掉了，反复重复很多次也固定不上，不知道是什么原因，希望达人们帮帮忙，十分感谢！
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1楼 2013-04-22 15:58:26
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reninhat

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 金币+1, 谢谢分享经验 2013-04-23 06:55:13
yaocx226: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-04-24 08:37:55
包被和反应缓冲液的选择，还有反应条件都需要探索。我们在我们自己的高分子蛋白芯片的表面改性和结合条件也花了很多功夫才调整出来的
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2楼2013-04-22 16:02:45
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yaocx226

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by reninhat at 2013-04-22 16:02:45
包被和反应缓冲液的选择，还有反应条件都需要探索。我们在我们自己的高分子蛋白芯片的表面改性和结合条件也花了很多功夫才调整出来的

谢谢您的回答！反应缓冲液是甘油溶液吗？是放在湿盒里反应还是真空中反应啊，文献中的反应条件也不一致，我都尝试过，感觉都不太理想。请问您的反应条件大概是什么呢？我是手动点样，不是点样仪点样。
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3楼2013-04-22 19:49:39
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reninhat

铁杆木虫 (正式写手)
点样缓冲液是甘油体系，不过我们的蛋白芯片是在类似酶标板的形制里，所以包被、抚育、洗板和标记都是类似酶标板的条件来摸索的
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4楼2013-04-22 20:44:25
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一步一步

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 金币+2, 谢谢参与 2013-04-23 06:55:33
yaocx226: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-04-24 08:38:14
尝试以下碱性条件下反应。
另外，荧光标记的蛋白上的可以反应的氨基个数可能很少，因为荧光标记到蛋白上通常是与蛋白上的氨基反应了。
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5楼2013-04-22 22:10:25
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