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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 求助！为什么我的蛋白紫外光谱的最大吸收峰在257nm？？？疯掉了
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一毫升的枪

新虫 (小有名气)

[求助] 求助！为什么我的蛋白紫外光谱的最大吸收峰在257nm？？？疯掉了

RT，我纯化出来的蛋白质扫描紫外光谱的时候最大吸收峰在257nm,觉得很奇怪啊，怎么会偏离280那么多呢？求各位大侠帮忙解答啊
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1楼 2013-04-18 10:06:50
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BioChemCom

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

WB证明了，那你要确定那条带的量是多大。
1. WB的检测非常灵敏；是否有可能你的蛋白混在杂蛋白里面？
2. 你的蛋白是否结合其它的离子、辅酶？
3. 你的蛋白是否有降解？

这些问题比较具体，如果你纯化蛋白经验比较多，对这个蛋白的背景知识了解比较多，其实综合起来是比较好判断的。很多时候这样的判断来自经验的积累。

祝你好运。
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11楼2013-04-22 08:19:25
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ynkuaile

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 金币+3, 分析得有道理 2013-04-20 08:40:42
一般蛋白质的最大吸收峰在280，只是一般情况，Tyr λmax 是275， Phe λmax 是257， Trp λmax是 280.可能你蛋白质中Phe的含量比其他二者要高。如果溶液或蛋白中存在其他干扰物质另当别论。
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2楼2013-04-18 10:25:03
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BioChemCom

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 金币+1, 谢谢参与 2013-04-20 08:41:18
把序列放上来，大家就会帮你分析了。楼上的分析也很对。总体上来说，你的蛋白可能没有Trp，但是Phe比较多。除非例外，你的蛋白吸收系数不会很大。
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3楼2013-04-18 12:06:17
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一毫升的枪

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ynkuaile at 2013-04-18 10:25:03
一般蛋白质的最大吸收峰在280，只是一般情况，Tyr λmax 是275， Phe λmax 是257， Trp λmax是 280.可能你蛋白质中Phe的含量比其他二者要高。如果溶液或蛋白中存在其他干扰物质另当别论。

我的蛋白Phe11个，Trp2个，Tyr6个~~~
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4楼2013-04-18 13:19:19
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