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急求进样后HPLC柱压升高的原因!!
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| 本人在做一个抗癌药物的分析,发现进样时进一针,柱压便升高1~2MPa,分析条件是:diol二醇基色谱柱(非新柱子),流动相乙腈:水=92:8,流速1ml/min,柱温30度,情况是这样,之前柱子是正用,分析了几天后柱压增加显著,有些堵了,由于实验紧急,就先反过来用了。冲柱子的顺序是进样前纯乙腈--70%乙腈---流动相(92%乙腈),反用后冲乙腈的柱压是3.8mpa,冲70%乙腈是6.8mpa,92%乙腈是4.2.mpa,进样后的柱压情况是 进了一针柱压变为5.2mpa,进了两针变为5.7mpa,进了第三针就变成了10mpa,不敢进了,怕柱子反用也废掉。这是为什么呢?1我的样品是过膜后稀释的,并且用流动相稀释应该也不会出现进样后晶体析出的现象,别人用这个机器的时候显示正常,这是柱子自身的问题呢?还是我的操作哪里有不对的地方?请各位前辈多多指教,不胜感激!!还想问一下,如果反用了柱子还能再正用吗? |
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qwerasdf2783
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