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急求进样后HPLC柱压升高的原因！！
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| 本人在做一个抗癌药物的分析，发现进样时进一针，柱压便升高1~2MPa,分析条件是：diol二醇基色谱柱（非新柱子）,流动相乙腈：水=92：8，流速1ml/min,柱温30度，情况是这样，之前柱子是正用，分析了几天后柱压增加显著，有些堵了，由于实验紧急，就先反过来用了。冲柱子的顺序是进样前纯乙腈--70%乙腈---流动相（92%乙腈），反用后冲乙腈的柱压是3.8mpa,冲70%乙腈是6.8mpa,92%乙腈是4.2.mpa,进样后的柱压情况是 进了一针柱压变为5.2mpa,进了两针变为5.7mpa,进了第三针就变成了10mpa，不敢进了，怕柱子反用也废掉。这是为什么呢？1我的样品是过膜后稀释的，并且用流动相稀释应该也不会出现进样后晶体析出的现象，别人用这个机器的时候显示正常，这是柱子自身的问题呢？还是我的操作哪里有不对的地方？请各位前辈多多指教，不胜感激！！还想问一下，如果反用了柱子还能再正用吗？ |
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zhenwuhuang
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