24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
南方科技大学公共卫生及应急管理学院2026级博士研究生招生报考通知(长期有效)
查看: 3384  |  回复: 27

许老板

金虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by fool_proof at 2013-04-17 19:22:19
我前后的回复一起看吧,具体的时间需要你自己摸索。你这方案在盐析纯化这一步,我觉得弄反了。还有一点,6 mol/L NaOH溶液(C)调节pH值到7,胶原也肯能沉淀出来。猪龄的大小对工艺影响很大,胎牛皮或者新生牛皮最 ...

胶原蛋白透析,老师说要看透析需要的分子量来处理透析袋,我在网上查了下,方案里面都没有这方面的说明,求助求助啊!!
还有胃蛋白酶处理之后,加氯化钠至4.4mol/L,就像凝胶一样,这种状态对不对啊,下一步离心都不好处理了额。
11楼2013-05-17 10:45:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fool_proof

铁杆木虫 (正式写手)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
markar: 金币+1, 感谢回帖交流! 2013-05-17 20:11:29
引用回帖:
11楼: Originally posted by 许老板 at 2013-05-17 10:45:05
胶原蛋白透析,老师说要看透析需要的分子量来处理透析袋,我在网上查了下,方案里面都没有这方面的说明,求助求助啊!!
还有胃蛋白酶处理之后,加氯化钠至4.4mol/L,就像凝胶一样,这种状态对不对啊,下一步离心 ...

一般都是8000~14000的透析袋
凝胶状有点不正常,盐析一般都是有沉淀的,剩下的是水溶液。
渴望旅游
12楼2013-05-17 14:02:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

许老板

金虫 (小有名气)

引用回帖:
12楼: Originally posted by fool_proof at 2013-05-17 14:02:19
一般都是8000~14000的透析袋
凝胶状有点不正常,盐析一般都是有沉淀的,剩下的是水溶液。...

粉末状的沉淀吗?前一步提取之后离心的上清就是比较稠的溶液,我是直接加的nacl固体,然后就像胶一样了。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
13楼2013-05-17 18:43:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

许老板

金虫 (小有名气)

引用回帖:
12楼: Originally posted by fool_proof at 2013-05-17 14:02:19
一般都是8000~14000的透析袋
凝胶状有点不正常,盐析一般都是有沉淀的,剩下的是水溶液。...

加NaCl到4.4M以后就成了烧杯里面那样,离心我用了4℃ 8000r/min 15min 一次没效果,两次就是离心管的那样了。是不是因为猪皮前期处理脂肪没除干净啊?在用胃蛋白酶提取时也是浑浊的稠液。

IMAG0943.jpg



IMAG0944.jpg



IMAG0945.jpg

14楼2013-05-17 23:50:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

许老板

金虫 (小有名气)

引用回帖:
12楼: Originally posted by fool_proof at 2013-05-17 14:02:19
一般都是8000~14000的透析袋
凝胶状有点不正常,盐析一般都是有沉淀的,剩下的是水溶液。...

回复一下我把
15楼2013-05-18 23:24:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fool_proof

铁杆木虫 (正式写手)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
红舟流星: 金币+1, 应助指数+1, 欢迎来生物材料板块应助交流 2013-05-19 23:58:14
引用回帖:
15楼: Originally posted by 许老板 at 2013-05-18 23:24:48
回复一下我把...

转速提高下试试,看离心管的情况是离心力不够
渴望旅游
16楼2013-05-19 20:20:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

许老板

金虫 (小有名气)

引用回帖:
16楼: Originally posted by fool_proof at 2013-05-19 20:20:13
转速提高下试试,看离心管的情况是离心力不够...

老师也是这样说的  我加到了12000   勉强弄出来了,,,现在又有新问题了,,
我是照你的方案来的:加入tris中性液中(tris=0.1M,NaCl=1.0M, pH=7.2~7.6),搅拌使沉淀溶解,再加NaCl至浓度为1.7M进行盐析。离心取上清,加入NaCl至最终浓度为2.6M。再次离心取沉淀溶于1%的乙酸中,4℃下静置过夜。  tris中性液ph=7.40   沉淀溶解不明显,,,,然后我想了下  溶多少算多少吧,,,然后就离心取上清了,,,,现在加NaCl,,,没有沉淀出来
17楼2013-05-19 23:22:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fool_proof

铁杆木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
17楼: Originally posted by 许老板 at 2013-05-19 23:22:13
老师也是这样说的  我加到了12000   勉强弄出来了,,,现在又有新问题了,,
我是照你的方案来的:加入tris中性液中(tris=0.1M,NaCl=1.0M, pH=7.2~7.6),搅拌使沉淀溶解,再加NaCl至浓度为1.7M进 ...

1%的乙酸中静置很难溶解的,需要搅拌
渴望旅游
18楼2013-05-20 08:18:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

许老板

金虫 (小有名气)

引用回帖:
18楼: Originally posted by fool_proof at 2013-05-20 08:18:16
1%的乙酸中静置很难溶解的,需要搅拌...

我还没有到那一步有,上一步没有沉淀出来啊,

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
19楼2013-05-20 13:42:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fool_proof

铁杆木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
19楼: Originally posted by 许老板 at 2013-05-20 13:42:44
我还没有到那一步有,上一步没有沉淀出来啊,
...

盐析到2.6M之后就没有盐析了呀 ,1%的乙酸溶解就是为了透析了
渴望旅游
20楼2013-05-20 17:57:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 许老板 的主题更新
普通表情 高级回复(可上传附件)
信息提示
请填处理意见