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anqisbaby

新虫 (小有名气)

[交流] MALDI-TOF-MS 已有5人参与

请问,做MALDI-TOF-MS时盐离子的浓度影响大么,我的溶液是1L 水中氯化钠8g,十二水磷酸氢二钠2.9g,磷酸二氢钾0.2g,能不能直接去做这个质谱呢? 谢谢
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cpn

木虫 (正式写手)


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MALDI Contamination Limits
Analysis is relatively insensitive to contaminant       
        Phosphate        20 mM                EDTA                1 mM
        Detergents        0.1%                Glycine                20 mM
        Glycerol        2%                Sodium Citrate        20 mM
        Buffer (Tris)        50 mM                K phosphate        25 mM
        Guanidine        1 M                Na phosphate        0.1M
        Na azide        1%                Octyl glucoside        0.3%
        SDS                0.05%                Ammon. Bicarb.        0.1M
Suggested analyte concentrations
    ~1 pmol @ <10 000 Da (pure)
    ~100 pmol @ >50 000 Da (pure)
bruker的,实际耐受值可能比这还更低一些,也就是说这几乎是上限了,lz参考一下。
8楼2013-04-18 22:41:57
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普通回帖

lzjessie_wlf

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
样品的浓度是多少?
2楼2013-04-16 22:54:18
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anqisbaby

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by lzjessie_wlf at 2013-04-16 22:54:18
样品的浓度是多少?

样品有2mg/mL
谢谢
3楼2013-04-17 14:44:39
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jack2070

木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
不可以。
你这样会米有信号的
先通过离子交换柱之类的脱盐吧
平生之志,唯求温饱!
4楼2013-04-17 18:52:02
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padodo

至尊木虫 (职业作家)

胖嘟嘟

优秀版主


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
盐对信号的影响巨大
我有什么能帮助您的吗?
5楼2013-04-17 20:42:29
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lzjessie_wlf

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
恩,如果说浓度的话,M或者uM之类的更容易比较。
  你这个样品盐的浓度到几百个mM级别,如果样品的浓度相当,可以稀释后做样。
还可以dialysis 脱盐,或者是ziptip 脱盐。。。。。。。。
6楼2013-04-17 22:08:18
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lzjessie_wlf

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by anqisbaby at 2013-04-17 14:44:39
样品有2mg/mL
谢谢...

如果是分子量小于2000的peptide,与盐浓度差不多,可以试一下。
如果是DNA或者分子量上万,就必需脱盐了。
7楼2013-04-17 22:12:13
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anqisbaby

新虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by cpn at 2013-04-18 22:41:57
MALDI Contamination Limits
Analysis is relatively insensitive to contaminant       
        Phosphate        20 mM                EDTA                1 mM
        Detergents        0.1%                Glycine                20 mM
        Glycerol        2%                Sodium Citrate        20 mM
        Buffer (Tris)        50 m ...

谢谢
9楼2013-04-18 23:08:19
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羽飞1999

木虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
其实没有这么大,我用bruker,一般做肽段分析(CHCA基质),PBS浓度的容忍度可以到50mM,ABC浓度可以到100mM, 如果是做蛋白(SA基质),比如做RNase B,盐浓度达到0.5M 的NaCl都毫无压力,你这个做肽段可能会比较掩盖,蛋白绝对毫无压力
10楼2013-05-03 20:51:45
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