| 查看: 1734 | 回复: 7 | |||
[求助]
糖肽（肽含量很少）用β消除法分离糖链和肽段后，怎么测定该反应已经完全反应了？
|
| 本人想鉴定糖肽中是否只有O连接，用β消除法分离糖链和肽段后，怎么测定该反应已经完全反应了？求指教 |
回复此楼» 猜你喜欢
朋友圈看到的
已经有9人回复
-
能否退出参与的面上项目解除限项
已经有13人回复
-
让我中一个面上吧！
已经有16人回复
-
放榜前的不淡定
已经有17人回复
-
科研孤儿太难了
已经有19人回复
-
明天应该可查了！？
已经有4人回复
-
什么时候开奖？
已经有11人回复
-
范进中举一文的中心思想
已经有6人回复
-
建议基金发布提前给出明确的时间点
已经有14人回复
-
2026国自然函评费到账
已经有17人回复
【答案】应助回帖
感谢参与，应助指数 +1
|
lz说的是β-消除-马氏加成（BEMAD）方法吧。该方法O-连接糖修饰的Thr和Ser会发生β-消除反应，在α碳和侧链原子之间形成双键，二硫苏糖醇（DTT）打开双键并与硫醇形成二硫键，进一步通过硫醇亲和柱富集糖修饰的蛋白。不知道lz是想检测什么，如果仅仅是检测O连糖有无，那反应不完全应该问题也不大。如果是想鉴定位点，那反应完全肯定是最好的。lz可以参考复旦大学一个博士论文（作者名字忘了，你可以查一下），这个人BEMAD摸了多种方法，可能会涉及到相关反应完全与否的检测。 ps,如果想测定o连糖，可以尝试pngase F酶切除N连接糖（绝大部分），再用凝集素做富集，LC-MS/MS检测，如果lz还有时间有材料去重复这个实验的话。 |
2楼2013-04-17 10:53:09
3楼2013-04-17 21:53:26
|
加到附件了。 |
» 本帖附件资源列表
-
欢迎监督和反馈：小木虫仅提供交流平台，不对该内容负责。
本内容由用户自主发布，如果其内容涉及到知识产权问题，其责任在于用户本人，如对版权有异议，请联系邮箱：xiaomuchong@tal.com - 附件 1 : 2011复旦——基于生物质谱的糖蛋白组学新技术新方法研究.nh
2013-04-19 13:23:10, 15.03 M
4楼2013-04-19 13:23:45
5楼2013-04-21 19:18:57
凌波丽
专家顾问 (知名作家)
-
专家经验: +218 - BioEPI: 11
- 应助: 397 (硕士)
- 贵宾: 0.044
- 金币: 2119.9
- 散金: 10
- 红花: 209
- 帖子: 5633
- 在线: 571.6小时
- 虫号: 1766465
- 注册: 2012-04-19
- 性别: MM
- 专业: 生物大分子结构与功能
- 管辖: 生物科学综合
6楼2013-04-21 19:38:11
7楼2013-04-22 11:11:36
8楼2013-04-23 21:14:56
