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木叶轩

新虫 (初入文坛)

[求助] 引物问题

在英文文献上看到的引物,通过BLAST查到序列后,在primmer上查对,结果几个选项全是红的,这个引物还能用吗
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tianyinghu

金虫 (小有名气)

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木叶轩(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香。期待你的慷慨解囊。快乐每一天 2013-04-13 10:24:17
可以,引物不可能十全十美的,不放心的话,把序列与引物发出来让大家帮你看下。
2楼2013-04-12 12:38:59
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木叶轩

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by tianyinghu at 2013-04-12 12:38:59
可以,引物不可能十全十美的,不放心的话,把序列与引物发出来让大家帮你看下。

这样也行?

未命名.jpg



111.jpg

3楼2013-04-12 13:27:43
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖


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木叶轩(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-04-29 14:31:17
要看引物是做什么用,一般克隆的话,即使有一些问题也是可以用的。如果做荧光定量,对引物的质量要求比较高。
4楼2013-04-12 14:18:59
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木叶轩

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-04-12 14:18:59
要看引物是做什么用,一般克隆的话,即使有一些问题也是可以用的。如果做荧光定量,对引物的质量要求比较高。

这个文献上设计的就是荧光定量的引物
5楼2013-04-12 18:05:45
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by 木叶轩 at 2013-04-12 18:05:45
这个文献上设计的就是荧光定量的引物...

做荧光定量的引物即使是文献上的也不一定好用。一般还是根据需要自己设计。
6楼2013-04-13 05:13:27
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duzhichao

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


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木叶轩(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-04-29 14:31:28
不能全按照文献上的来,你得看文献的准确度高不高?可以找高人教你一下你就会了,一般发卡,引物二聚体,错配二聚体最好不要是红的。
天道酬勤!
7楼2013-04-14 11:13:24
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爱上文慧

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


木叶轩(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-04-29 14:31:37
文献如果来自比较好的期刊,那应该没有问题,有时候引物出现二聚体和发夹结构也可以。
你可以自己设计一个引物,往往删减一两个碱基就可能没有引物二聚体什么的了
每一个你讨厌的现在都有一个不努力的曾经
8楼2013-04-15 11:24:37
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木叶轩

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 爱上文慧 at 2013-04-15 11:24:37
文献如果来自比较好的期刊,那应该没有问题,有时候引物出现二聚体和发夹结构也可以。
你可以自己设计一个引物,往往删减一两个碱基就可能没有引物二聚体什么的了

影响因子5.4
9楼2013-04-16 15:17:57
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奔跑的乌拉龟

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

你看看代尔塔G值,不能大于-4.5吧,好像

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
脚踏实地
10楼2013-04-16 16:44:28
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